გმადლობთ Nature.com-ის მონახულებისთვის.ბრაუზერის ვერსიას, რომელსაც იყენებთ, აქვს შეზღუდული CSS მხარდაჭერა.საუკეთესო შედეგისთვის, გირჩევთ გამოიყენოთ თქვენი ბრაუზერის უფრო ახალი ვერსია (ან გამორთოთ თავსებადობის რეჟიმი Internet Explorer-ში).იმავდროულად, მუდმივი მხარდაჭერის უზრუნველსაყოფად, ჩვენ ვაჩვენებთ საიტს სტილის ან JavaScript-ის გარეშე.
მცენარეული წარმოშობის ინსექტიციდური ნაერთების კომბინაციებმა შეიძლება გამოავლინოს სინერგიული ან ანტაგონისტური ურთიერთქმედება მავნებლების წინააღმდეგ.Aedes-ის კოღოებით გამოწვეული დაავადებების სწრაფი გავრცელების და ტრადიციული ინსექტიციდების მიმართ Aedes-ის კოღოების პოპულაციის მზარდი წინააღმდეგობის გათვალისწინებით, მცენარეულ ეთერზეთებზე დაფუძნებული ტერპენის ნაერთების ოცდარვა კომბინაცია ჩამოყალიბდა და ტესტირება Aedes aegypti-ის ლარვისა და ზრდასრული სტადიების წინააღმდეგ.ხუთი მცენარეული ეთერზეთი (EO) თავდაპირველად შეფასებული იყო მათი ლარვიციდული და მოზრდილებში გამოყენების ეფექტურობისთვის, და ორი ძირითადი ნაერთი გამოვლინდა თითოეულ EO-ში GC-MS შედეგების საფუძველზე.შეძენილი იქნა ძირითადი იდენტიფიცირებული ნაერთები, კერძოდ, დიალილ დისულფიდი, დიალილ ტრისულფიდი, კარვონი, ლიმონენი, ევგენოლი, მეთილის ევგენოლი, ევკალიპტოლი, ევდესმოლი და კოღოს ალფა-პინენი.შემდეგ ამ ნაერთების ორობითი კომბინაციები მომზადდა ქველეტალური დოზების გამოყენებით და მათი სინერგიული და ანტაგონისტური ეფექტების ტესტირება და განსაზღვრა.საუკეთესო ლარვიციდული კომპოზიციები მიიღება ლიმონინის დიალილ დისულფიდთან შერევით, ხოლო საუკეთესო ზრდასრული კომპოზიციები მიიღება კარვონის ლიმონენთან შერევით.კომერციულად გამოყენებული სინთეზური ლარვიციდი Temphos და ზრდასრული პრეპარატი მალათიონი ტესტირება მოხდა ცალ-ცალკე და ორობითი კომბინაციით ტერპენოიდებთან.შედეგებმა აჩვენა, რომ ტემეფოსისა და დიალილ დისულფიდისა და მალატიონისა და ევდესმოლის კომბინაცია იყო ყველაზე ეფექტური კომბინაცია.ამ ძლიერ კომბინაციებს აქვთ Aedes aegypti-ის წინააღმდეგ გამოყენების პოტენციალი.
მცენარეული ეთერზეთები (EOs) არის მეორადი მეტაბოლიტები, რომლებიც შეიცავს სხვადასხვა ბიოაქტიურ ნაერთებს და სულ უფრო მნიშვნელოვანი ხდება, როგორც სინთეზური პესტიციდების ალტერნატივა.ისინი არა მხოლოდ ეკოლოგიურად და მოსახერხებელია მომხმარებლისთვის, არამედ ისინი წარმოადგენენ სხვადასხვა ბიოაქტიური ნაერთების ნაზავს, რაც ასევე ამცირებს წამლისადმი რეზისტენტობის განვითარების ალბათობას1.GC-MS ტექნოლოგიის გამოყენებით, მკვლევარებმა შეისწავლეს სხვადასხვა მცენარეული ეთერზეთების შემადგენელი კომპონენტები და გამოავლინეს 3000-ზე მეტი ნაერთი 17500 არომატული მცენარიდან2, რომელთა უმეტესობა შემოწმებული იყო ინსექტიციდულ თვისებებზე და, როგორც ცნობილია, აქვს ინსექტიციდური ეფექტი3,4.ზოგიერთი კვლევა ხაზს უსვამს, რომ ნაერთის ძირითადი კომპონენტის ტოქსიკურობა იგივეა ან მეტი, ვიდრე მისი ნედლი ეთილენის ოქსიდი.მაგრამ ცალკეული ნაერთების გამოყენებამ შეიძლება კვლავ დატოვოს ადგილი რეზისტენტობის განვითარებისთვის, როგორც ეს ხდება ქიმიურ ინსექტიციდებთან5,6.აქედან გამომდინარე, ამჟამინდელი ყურადღება გამახვილებულია ეთილენის ოქსიდზე დაფუძნებული ნაერთების ნარევების მომზადებაზე ინსექტიციდური ეფექტურობის გასაუმჯობესებლად და მავნებლების სამიზნე პოპულაციებში წინააღმდეგობის ალბათობის შესამცირებლად.EO-ში არსებულ ცალკეულ აქტიურ ნაერთებს შეიძლება აჩვენონ სინერგიული ან ანტაგონისტური ეფექტები კომბინაციებში, რომლებიც ასახავს EO-ს საერთო აქტივობას, ფაქტი, რომელიც კარგად იყო ხაზგასმული წინა მკვლევარების მიერ ჩატარებულ კვლევებში7,8.ვექტორული კონტროლის პროგრამა ასევე მოიცავს EO-ს და მის კომპონენტებს.ეთერზეთების კოღოციდური აქტივობა ფართოდ არის შესწავლილი კულექსისა და ანოფელეს კოღოებზე.რამდენიმე კვლევამ სცადა ეფექტური პესტიციდების შემუშავება სხვადასხვა მცენარის კომერციულად გამოყენებულ სინთეტიკურ პესტიციდებთან კომბინაციით, რათა გაზარდოს საერთო ტოქსიკურობა და მინიმუმამდე დაიყვანოს გვერდითი მოვლენები9.მაგრამ ასეთი ნაერთების კვლევები Aedes aegypti-ის წინააღმდეგ იშვიათია.სამედიცინო მეცნიერების მიღწევებმა და წამლებისა და ვაქცინების შემუშავებამ ხელი შეუწყო ზოგიერთი ვექტორული დაავადების წინააღმდეგ ბრძოლას.მაგრამ Aedes aegypti კოღოს მიერ გადაცემული ვირუსის სხვადასხვა სეროტიპების არსებობამ გამოიწვია ვაქცინაციის პროგრამების ჩავარდნა.ამიტომ, როდესაც ასეთი დაავადებები ხდება, ვექტორის კონტროლის პროგრამები დაავადების გავრცელების პრევენციის ერთადერთი საშუალებაა.დღევანდელ სცენარში Aedes aegypti-ის კონტროლი ძალზე მნიშვნელოვანია, რადგან ის წარმოადგენს სხვადასხვა ვირუსების და მათი სეროტიპების საკვანძო ვექტორს, რომლებიც იწვევენ დენგეს ცხელებას, ზიკას, დენგეს ჰემორაგიულ ცხელებას, ყვითელ ცხელებას და ა.შ. ყველაზე საყურადღებოა ის ფაქტი, რომ ეგვიპტეში ყოველწლიურად მატულობს აედეს-გადამდები დაავადებების თითქმის ყველა ვექტორული დაავადების შემთხვევები და იზრდება მთელ მსოფლიოში.აქედან გამომდინარე, ამ კონტექსტში, აუცილებელია Aedes aegypti-ის პოპულაციებისთვის ეკოლოგიურად სუფთა და ეფექტური კონტროლის ზომების შემუშავება.ამ მხრივ პოტენციური კანდიდატები არიან EO-ები, მათი შემადგენელი ნაერთები და მათი კომბინაციები.აქედან გამომდინარე, ეს კვლევა ცდილობდა გამოევლინა ძირითადი მცენარეული EO ნაერთების ეფექტური სინერგიული კომბინაციები ინსექტიციდური თვისებების მქონე ხუთი მცენარიდან (ანუ პიტნა, წმინდა რეჰანი, ევკალიპტის ლაქები, Allium გოგირდი და melaleuca) Aedes aegypti-ის წინააღმდეგ.
ყველა შერჩეულმა EO-მ აჩვენა პოტენციური ლარვიციდური აქტივობა Aedes aegypti-ის მიმართ 24-სთ LC50 0.42-დან 163.65 ppm-მდე.ყველაზე მაღალი ლარვიციდური აქტივობა დაფიქსირდა პიტნის (Mp) EO-სთვის LC50 მნიშვნელობით 0.42 ppm 24 სთ-ზე, რასაც მოჰყვა ნიორი (As) LC50 მნიშვნელობით 16.19 ppm 24 სთ-ზე (ცხრილი 1).
Ocimum Sainttum-ის, Os EO-ს გარდა, დანარჩენი ოთხივე სკრინინგული EO-მ აჩვენა აშკარა ალერციდული ეფექტები, LC50 მნიშვნელობებით მერყეობს 23,37-დან 120,16 ppm-მდე 24-საათიანი ექსპოზიციის პერიოდში.Thymophilus striata (Cl) EO იყო ყველაზე ეფექტური მოზრდილების მკვლელობაში LC50 მნიშვნელობით 23.37 ppm ექსპოზიციიდან 24 საათის განმავლობაში, რასაც მოჰყვა Eucalyptus maculata (Em), რომელსაც ჰქონდა LC50 მნიშვნელობა 101.91 ppm (ცხრილი 1).მეორე მხრივ, LC50 მნიშვნელობა Os-ისთვის ჯერ არ არის განსაზღვრული, რადგან სიკვდილიანობის ყველაზე მაღალი მაჩვენებელი 53% დაფიქსირდა უმაღლეს დოზაზე (დამატებითი სურათი 3).
თითოეულ EO-ში ორი ძირითადი შემადგენელი ნაერთი იდენტიფიცირებული და შერჩეული იყო NIST ბიბლიოთეკის მონაცემთა ბაზის შედეგების, GC ქრომატოგრამის ფართობის პროცენტულობისა და MS სპექტრის შედეგების საფუძველზე (ცხრილი 2).EO As-ისთვის, გამოვლენილი ძირითადი ნაერთები იყო დიალილ დისულფიდი და დიალილ ტრისულფიდი;EO Mp-სთვის იდენტიფიცირებული ძირითადი ნაერთები იყო კარვონი და ლიმონენი, EO Em-ისთვის ძირითადი ნაერთები იყო ევდესმოლი და ევკალიპტოლი;EO Os-ისთვის, იდენტიფიცირებული ძირითადი ნაერთები იყო ევგენოლი და მეთილის ევგენოლი, ხოლო EO Cl-სთვის, იდენტიფიცირებული ძირითადი ნაერთები იყო ევგენოლი და α-პინენი (სურათი 1, დამატებითი ნახატები 5-8, დამატებითი ცხრილი 1-5).
შერჩეული ეთერზეთების ძირითადი ტერპენოიდების მასის სპექტრომეტრიის შედეგები (A-დიალილის დისულფიდი; B-დიალილის ტრისულფიდი; C-ევგენოლი; D-მეთილევგენოლი; E-ლიმონენი; F-არომატიული ცეპერონი; G-α-პინენი; H-ცინეოლი რ-ევდამოლი).
სულ ცხრა ნაერთი (დიალილის დისულფიდი, დიალილ ტრისულფიდი, ევგენოლი, მეთილის ევგენოლი, კარვონი, ლიმონენი, ევკალიპტოლი, ევდესმოლი, α-პინენი) გამოვლინდა, როგორც ეფექტური ნაერთები, რომლებიც წარმოადგენენ EO-ს ძირითად კომპონენტებს და ინდივიდუალურად იქნა ბიოშეფასებული Aedes aevalgy-ის წინააღმდეგ. ეტაპები..ნაერთს ევდესმოლს ჰქონდა ყველაზე მაღალი ლარვიციდური აქტივობა LC50 მნიშვნელობით 2.25 ppm 24 საათის ექსპოზიციის შემდეგ.ნაერთებს დიალილ დისულფიდსა და დიალილ ტრისულფიდს ასევე აქვთ პოტენციური ლარვიციდური ეფექტი, საშუალო ქველეტალური დოზებით 10-20 ppm დიაპაზონში.ზომიერი ლარვიციდური აქტივობა კვლავ დაფიქსირდა ნაერთებისთვის ევგენოლი, ლიმონენი და ევკალიპტოლი LC50 მნიშვნელობებით 63,35 ppm, 139,29 ppm.და 181.33 ppm 24 საათის შემდეგ, შესაბამისად (ცხრილი 3).თუმცა, მეთილის ევგენოლისა და კარვონის მნიშვნელოვანი ლარვიციდური პოტენციალი არ იქნა ნაპოვნი უმაღლეს დოზებშიც კი, ამიტომ LC50 მნიშვნელობები არ იყო გამოთვლილი (ცხრილი 3).სინთეზურ ლარვიციდს Temephos-ს ჰქონდა საშუალო ლეტალური კონცენტრაცია 0.43 ppm Aedes aegypti-ის მიმართ ექსპოზიციის 24 საათის განმავლობაში (ცხრილი 3, დამატებითი ცხრილი 6).
შვიდი ნაერთი (დიალილის დისულფიდი, დიალილ ტრისულფიდი, ევკალიპტოლი, α-პინენი, ევდესმოლი, ლიმონენი და კარვონი) იყო იდენტიფიცირებული, როგორც ეფექტური EO-ს ძირითადი ნაერთები და ინდივიდუალურად იქნა ტესტირება ზრდასრული ეგვიპტური Aedes კოღოების წინააღმდეგ.პრობიტის რეგრესიის ანალიზის მიხედვით, ევდესმოლს აქვს ყველაზე მაღალი პოტენციალი LC50 მნიშვნელობით 1,82 ppm, რასაც მოჰყვება ევკალიპტოლი LC50 მნიშვნელობით 17,60 ppm 24-საათიანი ექსპოზიციის დროს.დარჩენილი ხუთი შემოწმებული ნაერთი იყო ზომიერად საზიანო მოზრდილებისთვის LC50-ებით 140.79-დან 737.01 ppm-მდე (ცხრილი 3).სინთეზური ფოსფორორგანული მალათიონი იყო ნაკლებად ძლიერი ვიდრე ევდესმოლი და უფრო მაღალი ვიდრე დანარჩენი ექვსი ნაერთი, LC50 მნიშვნელობით 5.44 ppm 24-საათიანი ექსპოზიციის პერიოდში (ცხრილი 3, დამატებითი ცხრილი 6).
შვიდი ძლიერი ტყვიის ნაერთი და ორგანული ფოსფორის ტამფოსატი შეირჩა მათი LC50 დოზების ორობითი კომბინაციების ფორმულირებისთვის 1:1 თანაფარდობით.სულ მომზადდა 28 ორობითი კომბინაცია და ტესტირება მათი ლარვიციდური ეფექტურობისთვის Aedes aegypti-ის წინააღმდეგ.ცხრა კომბინაცია აღმოჩნდა სინერგიული, 14 კომბინაცია იყო ანტაგონისტური და ხუთი კომბინაცია არ იყო ლარვიციდური.სინერგიულ კომბინაციებს შორის, დიალილ დისულფიდის და ტემოფოლის კომბინაცია იყო ყველაზე ეფექტური, 100% სიკვდილიანობა დაფიქსირდა 24 საათის შემდეგ (ცხრილი 4).ანალოგიურად, ლიმონენის ნარევებმა დიალილ დისულფიდთან და ევგენოლთან ერთად თიმეტფოსთან ერთად აჩვენა კარგი პოტენციალი 98.3% ლარვების სიკვდილიანობით (ცხრილი 5).დანარჩენმა 4 კომბინაციამ, კერძოდ, ევდესმოლი პლუს ევკალიპტოლი, ევდესმოლი პლუს ლიმონენი, ევკალიპტოლი პლუს ალფა-პინენი, ალფა-პინენი პლუს ტემეფოსი, ასევე აჩვენა მნიშვნელოვანი ლარვიციდური ეფექტურობა, დაფიქსირებული სიკვდილიანობა 90%-ს აღემატება.მოსალოდნელი სიკვდილიანობის მაჩვენებელი 60-75%-ს უახლოვდება.(ცხრილი 4).თუმცა, ლიმონინის კომბინაციამ α-პინენთან ან ევკალიპტთან აჩვენა ანტაგონისტური რეაქციები.ანალოგიურად, ტემეფოსის ნარევებს ევგენოლთან ან ევკალიპტთან ან ევდესმოლთან ან დიალილ ტრისულფიდთან ანტაგონისტური ეფექტები აქვს.ანალოგიურად, დიალილ დისულფიდისა და დიალილ ტრისულფიდის კომბინაცია და რომელიმე ამ ნაერთების კომბინაცია ევდესმოლთან ან ევგენოლთან ანტაგონისტურია მათი ლარვიციდური მოქმედებით.ანტაგონიზმი ასევე დაფიქსირდა ევდესმოლის ევგენოლთან ან α-პინენთან კომბინაციაში.
ზრდასრულთა მჟავე აქტივობაზე შემოწმებული 28 ორობითი ნარევიდან 7 კომბინაცია იყო სინერგიული, 6-ს არ ჰქონდა ეფექტი და 15 იყო ანტაგონისტური.აღმოჩნდა, რომ ევდესმოლის ნარევები ევკალიპტთან და ლიმონენთან კარვონთან შედარებით უფრო ეფექტურია, ვიდრე სხვა სინერგიული კომბინაციები, სიკვდილიანობის მაჩვენებლებით 24 საათის განმავლობაში 76% და 100% შესაბამისად (ცხრილი 5).დაფიქსირდა, რომ მალათიონი ავლენს სინერგიულ ეფექტს ნაერთების ყველა კომბინაციით, გარდა ლიმონისა და დიალილ ტრისულფიდისა.მეორეს მხრივ, აღმოჩენილია ანტაგონიზმი დიალილ დისულფიდსა და დიალილ ტრისულფიდს შორის და რომელიმე მათგანის კომბინაციას ევკალიპტთან, ან ევკალიპტოლთან, ან კარვონთან ან ლიმონინთან.ანალოგიურად, α-პინენის კომბინაციებმა ევდესმოლთან ან ლიმონინთან, ევკალიპტოლთან კარვონთან ან ლიმონენთან და ლიმონენთან ევდესმოლთან ან მალატიონთან ერთად აჩვენა ანტაგონისტური ლარვიციდური ეფექტი.დანარჩენი ექვსი კომბინაციისთვის არ იყო მნიშვნელოვანი განსხვავება მოსალოდნელ და დაკვირვებულ სიკვდილიანობას შორის (ცხრილი 5).
სინერგიული ეფექტებისა და ქველეტალური დოზების საფუძველზე, მათი ლარვიციდური ტოქსიკურობა Aedes aegypti კოღოების დიდი რაოდენობის წინააღმდეგ საბოლოოდ იქნა შერჩეული და შემდგომი ტესტირება.შედეგებმა აჩვენა, რომ დაკვირვებული ლარვების სიკვდილიანობა ორობითი კომბინაციების გამოყენებით ევგენოლ-ლიმონენი, დიალილ დისულფიდ-ლიმონენი და დიალილ დისულფიდ-ტიიმფოსი იყო 100%, ხოლო მოსალოდნელი ლარვების სიკვდილიანობა იყო შესაბამისად 76.48%, 72.16% და 63.4% (ცხრილი 6)..ლიმონინისა და ევდესმოლის კომბინაცია შედარებით ნაკლებად ეფექტური იყო, 88% ლარვის სიკვდილიანობა დაფიქსირდა 24-საათიანი ექსპოზიციის პერიოდში (ცხრილი 6).მოკლედ, ოთხმა შერჩეულმა ორობითმა კომბინაციამ ასევე აჩვენა სინერგიული ლარვიციდური ეფექტები Aedes aegypti-ზე, როდესაც გამოიყენება ფართო მასშტაბით (ცხრილი 6).
შერჩეული იყო სამი სინერგიული კომბინაცია ზრდასრული Aedes aegypti-ის დიდი პოპულაციების გასაკონტროლებლად მოზრდილთა ბიოასეისთვის.მწერების დიდ კოლონიებზე შესამოწმებლად კომბინაციების შესარჩევად, ჩვენ პირველ რიგში ორი საუკეთესო სინერგიული ტერპენის კომბინაციაზე გავამახვილეთ ყურადღება, კერძოდ, კარვონს პლუს ლიმონენს და ევკალიპტოლს პლუს ევდესმოლს.მეორეც, საუკეთესო სინერგიული კომბინაცია შეირჩა სინთეზური ორგანოფოსფატური მალათიონისა და ტერპენოიდების კომბინაციიდან.ჩვენ გვჯერა, რომ მალატიონისა და ევდესმოლის კომბინაცია საუკეთესო კომბინაციაა დიდი მწერების კოლონიებზე შესამოწმებლად, ყველაზე მაღალი დაფიქსირებული სიკვდილიანობა და კანდიდატი ინგრედიენტების ძალიან დაბალი LC50 მნიშვნელობების გამო.მალათიონი ავლენს სინერგიზმს α-პინენთან, დიალილ დისულფიდთან, ევკალიპტთან, კარვონთან და ევდესმოლთან კომბინაციაში.მაგრამ თუ გადავხედავთ LC50 მნიშვნელობებს, Eudesmol-ს აქვს ყველაზე დაბალი მნიშვნელობა (2.25 ppm).მალთიონის, α-პინენის, დიალილ დისულფიდის, ევკალიპტოლის და კარვონის გამოთვლილი LC50 მნიშვნელობები იყო 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 და 140.79 ppm.შესაბამისად.ეს მნიშვნელობები მიუთითებს იმაზე, რომ მალატიონის და ევდესმოლის კომბინაცია არის ოპტიმალური კომბინაცია დოზირების თვალსაზრისით.შედეგებმა აჩვენა, რომ კარვონის პლუს ლიმონენისა და ევდესმოლის პლუს მალატიონის კომბინაციებს ჰქონდათ 100% დაფიქსირებული სიკვდილიანობა, მოსალოდნელ სიკვდილიანობასთან შედარებით 61%-დან 65%-მდე.სხვა კომბინაციამ, ევდესმოლმა პლუს ევკალიპტოლმა, აჩვენა სიკვდილიანობის მაჩვენებელი 78,66% ზემოქმედების შემდეგ 24 საათის შემდეგ, მოსალოდნელ სიკვდილიანობასთან შედარებით 60%.სამივე შერჩეულმა კომბინაციამ აჩვენა სინერგიული ეფექტი ზრდასრული Aedes aegypti-ის წინააღმდეგ ფართომასშტაბიანი გამოყენების შემთხვევაშიც კი (ცხრილი 6).
ამ კვლევაში, მცენარეთა შერჩეულმა EO-ებმა, როგორიცაა Mp, As, Os, Em და Cl, აჩვენეს პერსპექტიული ლეტალური ეფექტი Aedes aegypti-ის ლარვისა და ზრდასრულ სტადიებზე.Mp EO-ს ჰქონდა ყველაზე მაღალი ლარვიციდური აქტივობა LC50 მნიშვნელობით 0.42 ppm, რასაც მოჰყვა As, Os და Em EOs LC50 მნიშვნელობით 50 ppm-ზე ნაკლები 24 საათის შემდეგ.ეს შედეგები შეესაბამება კოღოების და სხვა დიპტერული ბუზების წინა კვლევებს10,11,12,13,14.მიუხედავად იმისა, რომ Cl-ის ლარვიციდური ძალა სხვა ეთერზეთებთან შედარებით დაბალია, LC50 მნიშვნელობით 163,65 ppm 24 საათის შემდეგ, მისი ზრდასრული პოტენციალი ყველაზე მაღალია LC50 მნიშვნელობით 23,37 ppm 24 საათის შემდეგ.Mp, As და Em EO-ებმა ასევე აჩვენეს კარგი ალერციდური პოტენციალი LC50 მნიშვნელობებით 100-120 ppm დიაპაზონში ექსპოზიციის 24 საათის განმავლობაში, მაგრამ შედარებით დაბალი იყო, ვიდრე მათი ლარვიციდური ეფექტურობა.მეორეს მხრივ, EO Os-მა აჩვენა უმნიშვნელო ალერციდური ეფექტი უმაღლესი თერაპიული დოზის დროსაც კი.ამრიგად, შედეგები მიუთითებს, რომ ეთილენის ოქსიდის ტოქსიკურობა მცენარეებისთვის შეიძლება განსხვავდებოდეს კოღოების განვითარების სტადიის მიხედვით15.ეს ასევე დამოკიდებულია EO-ების შეღწევის სიჩქარეზე მწერის სხეულში, მათ ურთიერთქმედებაზე კონკრეტულ სამიზნე ფერმენტებთან და კოღოს დეტოქსიკაციის შესაძლებლობებზე განვითარების თითოეულ ეტაპზე16.კვლევების დიდმა რაოდენობამ აჩვენა, რომ ძირითადი კომპონენტი ნაერთი მნიშვნელოვანი ფაქტორია ეთილენის ოქსიდის ბიოლოგიურ აქტივობაში, რადგან ის შეადგენს მთლიანი ნაერთების უმრავლესობას3,12,17,18.ამიტომ, ჩვენ განვიხილეთ ორი ძირითადი ნაერთი თითოეულ EO-ში.GC-MS შედეგების საფუძველზე, დიალილ დისულფიდი და დიალილ ტრისულფიდი გამოვლინდა, როგორც EO As-ის ძირითადი ნაერთები, რაც შეესაბამება წინა მოხსენებებს19,20,21.მიუხედავად იმისა, რომ წინა მოხსენებებში მითითებული იყო, რომ მენთოლი იყო მისი ერთ-ერთი მთავარი ნაერთი, კარვონი და ლიმონენი კვლავ გამოვლინდა, როგორც Mp EO22,23-ის მთავარი ნაერთები.Os EO-ს შემადგენლობის პროფილმა აჩვენა, რომ ევგენოლი და მეთილის ევგენოლი ძირითადი ნაერთებია, რაც მსგავსია ადრინდელი მკვლევარების დასკვნებისა16,24.ევკალიპტოლი და ევკალიპტოლი მოხსენებულია, როგორც ძირითადი ნაერთები, რომლებიც გვხვდება Em-ის ფოთლების ზეთში, რაც შეესაბამება ზოგიერთი მკვლევარის დასკვნებს25,26, მაგრამ ეწინააღმდეგება Olalade et al.27-ის დასკვნებს.მელალეუკას ეთერზეთში დაფიქსირდა ცინეოლისა და α-პინენის დომინირება, რაც წინა კვლევების მსგავსია28,29.დაფიქსირდა და ასევე დაფიქსირდა ამ კვლევაში ერთი და იგივე მცენარის სახეობიდან მოპოვებული ეთერზეთების შემადგენლობასა და კონცენტრაციაში შიდასახეობრივი განსხვავებები, რომლებიც გავლენას ახდენს მცენარეთა ზრდის გეოგრაფიულ პირობებზე, მოსავლის დროზე, განვითარების სტადიაზე ან მცენარის ასაკზე.ქიმიოტიპების გამოჩენა და სხვ.22,30,31,32.შემდეგ შეძენილი იქნა ძირითადი იდენტიფიცირებული ნაერთები და შემოწმდა მათი ლარვიციდური ეფექტისა და ზემოქმედებისთვის ზრდასრულ Aedes aegypti კოღოებზე.შედეგებმა აჩვენა, რომ დიალილ დისულფიდის ლარვიციდური აქტივობა შედარებულია ნედლი EO As-ის აქტივობასთან.მაგრამ დიალილ ტრისულფიდის აქტივობა უფრო მაღალია ვიდრე EO As.ეს შედეგები მსგავსია Kimbaris et al.33 Culex ფილიპინებზე.თუმცა, ამ ორ ნაერთს არ აჩვენა კარგი ავტოციდური აქტივობა სამიზნე კოღოების მიმართ, რაც შეესაბამება Plata-Rueda et al 34-ის შედეგებს Tenebrio molitor-ზე.Os EO ეფექტურია Aedes aegypti-ის ლარვის სტადიის წინააღმდეგ, მაგრამ არა ზრდასრული სტადიის წინააღმდეგ.დადგენილია, რომ ძირითადი ინდივიდუალური ნაერთების ლარვიციდური აქტივობა დაბალია, ვიდრე ნედლი Os EO-ს.ეს გულისხმობს სხვა ნაერთების როლს და მათ ურთიერთქმედებას ნედლი ეთილენის ოქსიდში.მხოლოდ მეთილის ევგენოლს აქვს უმნიშვნელო აქტივობა, ხოლო მარტო ევგენოლს აქვს ზომიერი ლარვიციდური აქტივობა.ეს დასკვნა ადასტურებს, ერთი მხრივ,35,36, ხოლო მეორე მხრივ, ეწინააღმდეგება ადრინდელი მკვლევარების დასკვნებს37,38.ევგენოლისა და მეთილეუგენოლის ფუნქციურ ჯგუფებში განსხვავებები შეიძლება გამოიწვიოს სხვადასხვა ტოქსიკურობა ერთი და იმავე სამიზნე მწერისთვის39.ლიმონენს ჰქონდა ზომიერი ლარვიციდური აქტივობა, კარვონის ეფექტი კი უმნიშვნელო იყო.ანალოგიურად, ლიმონინის შედარებით დაბალი ტოქსიკურობა ზრდასრული მწერებისთვის და კარვონის მაღალი ტოქსიკურობა მხარს უჭერს ზოგიერთი წინა კვლევის შედეგებს40, მაგრამ ეწინააღმდეგება სხვებს41.ორმაგი ბმების არსებობამ როგორც ინტრაციკლურ, ისე ეგზოციკლურ პოზიციებზე შეიძლება გაზარდოს ამ ნაერთების, როგორც ლარვიციდების სარგებლიანობა3,41, ხოლო კარვონი, რომელიც არის კეტონი უჯერი ალფა და ბეტა ნახშირბადებით, შეიძლება აჩვენოს ტოქსიკურობის უფრო მაღალი პოტენციალი მოზრდილებში42.თუმცა, ლიმონინისა და კარვონის ინდივიდუალური მახასიათებლები გაცილებით დაბალია, ვიდრე მთლიანი EO Mp (ცხრილი 1, ცხრილი 3).შემოწმებულ ტერპენოიდებს შორის აღმოჩნდა, რომ ევდესმოლს აქვს ყველაზე დიდი ლარვიციდური და ზრდასრული აქტივობა LC50 მნიშვნელობით 2,5 ppm-ზე დაბალი, რაც მას პერსპექტიულ ნაერთად აქცევს Aedes-ის კოღოების კონტროლისთვის.მისი შესრულება უკეთესია, ვიდრე მთელი EO Em-ის, თუმცა ეს არ შეესაბამება Cheng et al.40-ის დასკვნებს.ევდესმოლი არის სესკვიტერპენი ორი იზოპრენის ერთეულით, რომელიც ნაკლებად აქროლადია ვიდრე ჟანგბადის შემცველი მონოტერპენები, როგორიცაა ევკალიპტი და, შესაბამისად, აქვს პესტიციდის უფრო დიდი პოტენციალი.თავად ევკალიპტოლს აქვს უფრო მეტი ზრდასრული, ვიდრე ლარვიციდური აქტივობა და ადრეული კვლევების შედეგები მხარს უჭერს და უარყოფს ამას37,43,44.მხოლოდ აქტივობა თითქმის შედარებულია მთელი EO Cl.კიდევ ერთი ბიციკლური მონოტერპენი, α-პინენი, უფრო ნაკლებ გავლენას ახდენს ზრდასრულზე Aedes aegypti-ზე, ვიდრე ლარვიციდულ ეფექტს, რაც სრული EO Cl-ის ეფექტის საპირისპიროა.ტერპენოიდების საერთო ინსექტიციდურ აქტივობაზე გავლენას ახდენს მათი ლიპოფილურობა, არასტაბილურობა, ნახშირბადის განშტოება, პროექციის ფართობი, ზედაპირის ფართობი, ფუნქციური ჯგუფები და მათი პოზიციები45,46.ამ ნაერთებმა შეიძლება იმოქმედონ უჯრედების დაგროვების განადგურებით, რესპირატორული აქტივობის დაბლოკვით, ნერვული იმპულსების გადაცემის შეწყვეტით და ა.შ. უტალა48.სინთეზური ფოსფორორგანული მალათიონის ზრდასრულთა აქტივობა მოხსენებული იყო 5.44 ppm.მიუხედავად იმისა, რომ ამ ორ ორგანოფოსფატმა აჩვენა დადებითი პასუხი Aedes aegypti-ს ლაბორატორიული შტამების მიმართ, კოღოების წინააღმდეგობა ამ ნაერთების მიმართ დაფიქსირდა მსოფლიოს სხვადასხვა კუთხეში49.თუმცა, მსგავსი ცნობები მცენარეული მედიკამენტების მიმართ რეზისტენტობის განვითარების შესახებ არ იქნა ნაპოვნი50.ამრიგად, ბოტანიკური ნივთიერებები განიხილება, როგორც ქიმიური პესტიციდების პოტენციური ალტერნატივები ვექტორის კონტროლის პროგრამებში.
ლარვიციდური ეფექტი შემოწმებული იყო 28 ბინარულ კომბინაციაზე (1:1) მომზადებული ძლიერი ტერპენოიდებითა და ტერპენოიდებით თიმეტფოსთან და აღმოჩნდა, რომ 9 კომბინაცია იყო სინერგიული, 14 ანტაგონისტური და 5 ანტაგონისტური.არანაირი ეფექტი.მეორეს მხრივ, ზრდასრულთა პოტენციალის ბიოანალიზში 7 კომბინაცია აღმოჩნდა სინერგიული, 15 კომბინაცია იყო ანტაგონისტური და 6 კომბინაციას არ ჰქონდა ეფექტი.მიზეზი, რის გამოც გარკვეული კომბინაციები იწვევს სინერგიულ ეფექტს, შეიძლება განპირობებული იყოს კანდიდატი ნაერთების ურთიერთქმედებით ერთდროულად სხვადასხვა მნიშვნელოვან გზაზე, ან კონკრეტული ბიოლოგიური გზის სხვადასხვა ძირითადი ფერმენტების თანმიმდევრული ინჰიბიციით51.ლიმონენის კომბინაცია დიალილ დისულფიდთან, ევკალიპტთან ან ევგენოლთან აღმოჩნდა სინერგიული როგორც მცირე, ასევე დიდი მასშტაბის გამოყენებაში (ცხრილი 6), ხოლო მის კომბინაციას ევკალიპტთან ან α-პინენთან დადგინდა, რომ ანტაგონისტური ეფექტი აქვს ლარვებზე.საშუალოდ, ლიმონენი კარგი სინერგიულია, შესაძლოა მეთილის ჯგუფების არსებობის, რქოვანა შრეში კარგი შეღწევის და მოქმედების განსხვავებული მექანიზმის გამო52,53.ადრე იყო მოხსენებული, რომ ლიმონენმა შეიძლება გამოიწვიოს ტოქსიკური ეფექტები მწერების კუტიკულებში შეღწევით (კონტაქტური ტოქსიკურობა), საჭმლის მომნელებელ სისტემაზე (ანტიმკვებავი) ან სასუნთქ სისტემაზე (ფუმიგაციის აქტივობა) 54, ხოლო ფენილპროპანოიდებმა, როგორიცაა ევგენოლი, შეიძლება გავლენა მოახდინონ მეტაბოლურ ფერმენტებზე 55. ამიტომ ნაერთების კომბინაციებმა მოქმედების სხვადასხვა მექანიზმით შეიძლება გაზარდოს ნარევის საერთო ლეტალური ეფექტი.აღმოჩნდა, რომ ევკალიპტოლი იყო სინერგიული დიალილ დისულფიდთან, ევკალიპტთან ან α-პინენთან, მაგრამ სხვა კომბინაციები სხვა ნაერთებთან იყო ან არალარვიციდური ან ანტაგონისტური.ადრეულმა კვლევებმა აჩვენა, რომ ევკალიპტოლს აქვს ინჰიბიტორული აქტივობა აცეტილქოლინესთერაზაზე (AChE), ისევე როგორც ოქტაამინის და GABA რეცეპტორებზე56.ვინაიდან ციკლურ მონოტერპენებს, ევკალიპტოლს, ევგენოლს და ა.შ. შეიძლება ჰქონდეთ მოქმედების იგივე მექანიზმი, რაც მათ ნეიროტოქსიურ აქტივობას, 57 ამით მინიმუმამდე მცირდება მათი კომბინირებული ეფექტი ურთიერთდათრგუნვის გზით.ანალოგიურად, ტემეფოსის კომბინაცია დიალილ დისულფიდთან, α-პინენთან და ლიმონენთან აღმოჩნდა სინერგიული, რაც მხარს უჭერს წინა ცნობებს მცენარეულ პროდუქტებსა და სინთეზურ ორგანოფოსფატებს შორის სინერგიული ეფექტის შესახებ58.
აღმოჩნდა, რომ ევდესმოლისა და ევკალიპტოლის კომბინაციას აქვს სინერგიული ეფექტი Aedes aegypti-ის ლარვისა და ზრდასრული სტადიების მიმართ, შესაძლოა მათი მოქმედების განსხვავებული რეჟიმის გამო მათი განსხვავებული ქიმიური სტრუქტურის გამო.ევდესმოლი (სესკვიტერპენი) შეიძლება გავლენა იქონიოს სასუნთქ სისტემაზე 59 და ევკალიპტოლმა (მონოტერპენი) შეიძლება გავლენა იქონიოს აცეტილქოლინესტერაზაზე 60 .ინგრედიენტების ერთდროულმა ექსპოზიციამ ორ ან მეტ სამიზნე ადგილას შეიძლება გააძლიეროს კომბინაციის საერთო ლეტალური ეფექტი.ზრდასრული ნივთიერების ბიოანალიზში მალთიონი აღმოჩნდა სინერგიული კარვონთან ან ევკალიპტოლთან ან ევკალიპტოლთან ან დიალილ დისულფიდთან ან α-პინენთან, რაც მიუთითებს იმაზე, რომ ის სინერგიულია ლიმონენისა და დიის დამატებით.კარგი სინერგიული ალერციდის კანდიდატია ტერპენის ნაერთების მთელი პორტფელისთვის, გარდა ალილ ტრისულფიდისა.Thangam-მა და Kathiresan-მა61 ასევე მოახსენეს მალთიონის სინერგიული ეფექტის მსგავსი შედეგები მცენარეულ ექსტრაქტებთან.ეს სინერგიული რეაქცია შეიძლება გამოწვეული იყოს მალთიონისა და ფიტოქიმიკატების კომბინირებული ტოქსიკური ეფექტებით მწერების დეტოქსიკაციის ფერმენტებზე.ორგანოფოსფატები, როგორიცაა მალთიონი, ზოგადად მოქმედებენ ციტოქრომ P450 ესთერაზებისა და მონოოქსიგენაზების ინჰიბირებით62,63,64.აქედან გამომდინარე, მალატიონის შერწყმა მოქმედების ამ მექანიზმებთან და ტერპენების მოქმედების სხვადასხვა მექანიზმებთან შეიძლება გააძლიეროს საერთო ლეტალური ეფექტი კოღოებზე.
მეორეს მხრივ, ანტაგონიზმი მიუთითებს იმაზე, რომ შერჩეული ნაერთები ნაკლებად აქტიურია კომბინაციაში, ვიდრე თითოეული ნაერთი ცალკე.ზოგიერთ კომბინაციაში ანტაგონიზმის მიზეზი შეიძლება იყოს ის, რომ ერთი ნაერთი ცვლის მეორე ნაერთის ქცევას შეწოვის, განაწილების, მეტაბოლიზმის ან გამოყოფის სიჩქარის შეცვლით.ადრეული მკვლევარები თვლიდნენ, რომ ეს იყო წამლების კომბინაციების ანტაგონიზმის მიზეზი.მოლეკულები შესაძლო მექანიზმი 65. ანალოგიურად, ანტაგონიზმის შესაძლო მიზეზები შეიძლება დაკავშირებული იყოს მოქმედების მსგავს მექანიზმებთან, შემადგენელი ნაერთების კონკურენციასთან ერთი და იმავე რეცეპტორის ან სამიზნე ადგილისთვის.ზოგიერთ შემთხვევაში, შესაძლოა მოხდეს სამიზნე ცილის არაკონკურენტული ინჰიბირებაც.ამ კვლევაში ორორგანული გოგირდის ნაერთმა, დიალილ დისულფიდმა და დიალილ ტრისულფიდმა, აჩვენა ანტაგონისტური ეფექტები, შესაძლოა იმავე სამიზნე ადგილისთვის კონკურენციის გამო.ანალოგიურად, ამ ორმა გოგირდის ნაერთმა აჩვენა ანტაგონისტური ეფექტი და არ ჰქონდა ეფექტი ევდესმოლთან და α-პინენთან შერწყმისას.ევდესმოლი და ალფა-პინენი ბუნებით ციკლურია, ხოლო დიალილ დისულფიდი და დიალილ ტრისულფიდი ბუნებით ალიფატურია.ქიმიური სტრუქტურიდან გამომდინარე, ამ ნაერთების კომბინაციამ უნდა გაზარდოს საერთო ლეტალური აქტივობა, რადგან მათი სამიზნე ადგილები ჩვეულებრივ განსხვავებულია34,47, მაგრამ ექსპერიმენტულად აღმოვაჩინეთ ანტაგონიზმი, რაც შეიძლება გამოწვეული იყოს ამ ნაერთების როლით ზოგიერთ უცნობ ორგანიზმში in vivo.სისტემები ურთიერთქმედების შედეგად.ანალოგიურად, ცინეოლისა და α-პინენის ერთობლიობამ წარმოქმნა ანტაგონისტური რეაქციები, თუმცა მკვლევარებმა ადრე განაცხადეს, რომ ორ ნაერთს მოქმედების განსხვავებული სამიზნეები აქვს47,60.ვინაიდან ორივე ნაერთი არის ციკლური მონოტერპენები, შეიძლება არსებობდეს რამდენიმე საერთო სამიზნე ადგილი, რომელიც შეიძლება კონკურენცია გაუწიოს შეკავშირებას და გავლენა მოახდინოს შესწავლილი კომბინატორიული წყვილების საერთო ტოქსიკურობაზე.
LC50 მნიშვნელობებზე და დაკვირვებულ სიკვდილიანობაზე დაყრდნობით, შეირჩა ორი საუკეთესო სინერგიული ტერპენის კომბინაცია, კერძოდ, წყვილი კარვონი + ლიმონენი და ევკალიპტოლი + ევდესმოლი, ასევე სინთეზური ორგანოფოსფორის მალათიონი ტერპენებით.მალთიონის + ევდესმოლის ნაერთების ოპტიმალური სინერგიული კომბინაცია გამოკვლეული იყო ზრდასრულთა ინსექტიციდის ბიოანალიზში.მიმართეთ მწერების დიდ კოლონიებს, რათა დაადასტუროთ, შეუძლია თუ არა ამ ეფექტურ კომბინაციებს იმოქმედოს დიდი რაოდენობით ინდივიდების წინააღმდეგ შედარებით დიდ ექსპოზიციის სივრცეში.ყველა ეს კომბინაცია აჩვენებს სინერგიულ ეფექტს მწერების დიდი ჯგუფის წინააღმდეგ.მსგავსი შედეგები იქნა მიღებული ოპტიმალური სინერგიული ლარვიციდური კომბინაციისთვის, რომელიც გამოცდილია Aedes aegypti ლარვების დიდი პოპულაციების წინააღმდეგ.ამრიგად, შეიძლება ითქვას, რომ მცენარეული EO ნაერთების ეფექტური სინერგიული ლარვიციდული და ზრდასრულიციდური კომბინაცია არის ძლიერი კანდიდატი არსებული სინთეზური ქიმიკატების წინააღმდეგ და შეიძლება შემდგომში გამოყენებული იქნას Aedes aegypti პოპულაციების გასაკონტროლებლად.ანალოგიურად, სინთეზური ლარვიციდების ან ზრდასრულიციდების ეფექტური კომბინაციები ტერპენებთან ასევე შეიძლება გამოყენებულ იქნას კოღოებისთვის თიმეტფოსის ან მალატიონის დოზების შესამცირებლად.ამ ძლიერმა სინერგიულმა კომბინაციებმა შეიძლება უზრუნველყოს გადაწყვეტილებები მომავალი კვლევებისთვის Aedes-ის კოღოებში წამლების წინააღმდეგობის ევოლუციის შესახებ.
Aedes aegypti-ის კვერცხები შეგროვდა რეგიონალური სამედიცინო კვლევის ცენტრიდან, დიბრუგარში, ინდოეთის სამედიცინო კვლევების საბჭოდან და ინახებოდა კონტროლირებადი ტემპერატურის (28 ± 1 °C) და ტენიანობის (85 ± 5%) ზოოლოგიის დეპარტამენტში, გაუჰატის უნივერსიტეტში. შემდეგი პირობები: აღწერილი იყო არივოლი და სხვ.გამოჩეკვის შემდეგ ლარვები იკვებებოდნენ ლარვის საკვებით (ძაღლის ბისკვიტის ფხვნილი და საფუარი 3:1 თანაფარდობით) და მოზრდილები იკვებებოდნენ 10%-იანი გლუკოზის ხსნარით.აღმოცენებიდან მე-3 დღიდან დაწყებული, ზრდასრულ მდედრ კოღოებს საშუალება მიეცათ ალბინოს ვირთხების სისხლი გამოეწონათ.დაასველეთ ფილტრის ქაღალდი წყალში ჭიქაში და მოათავსეთ კვერცხის დასადებად გალიაში.
შერჩეული მცენარის ნიმუშები, კერძოდ, ევკალიპტის ფოთლები (Myrtaceae), წმინდა რეჰანი (Lamiaceae), პიტნა (Lamiaceae), მელალეუკა (Myrtaceae) და ალიუმის ბოლქვები (Amaryllidaceae).შეგროვებული გუვაჰათიდან და იდენტიფიცირებულია გაუჰატის უნივერსიტეტის ბოტანიკის დეპარტამენტის მიერ.შეგროვებული მცენარის ნიმუშები (500გრ) დაექვემდებარა ჰიდროდისტილაციას Clevenger-ის აპარატის გამოყენებით 6 საათის განმავლობაში.ამოღებული EO შეგროვდა სუფთა მინის ფლაკონებში და ინახებოდა 4°C-ზე შემდგომი კვლევისთვის.
ლარვიციდური ტოქსიკურობა შესწავლილი იყო ჯანმრთელობის მსოფლიო ორგანიზაციის ოდნავ შეცვლილი სტანდარტული პროცედურების გამოყენებით 67 .გამოიყენეთ DMSO, როგორც ემულგატორი.თითოეული EO კონცენტრაცია თავდაპირველად ტესტირებული იყო 100 და 1000 ppm-ზე, გამოაშკარავებული იყო 20 ლარვა თითოეულ რეპლიკაში.შედეგების მიხედვით, გამოყენებული იქნა კონცენტრაციის დიაპაზონი და სიკვდილიანობა დაფიქსირდა 1 სთ-დან 6 საათამდე (1 საათის ინტერვალით) და მკურნალობიდან 24 საათში, 48 საათსა და 72 საათში.ქველეტალური კონცენტრაციები (LC50) განისაზღვრა ექსპოზიციიდან 24, 48 და 72 საათის შემდეგ.თითოეული კონცენტრაცია გამოკვლეული იყო სამჯერ ერთად ერთი უარყოფითი კონტროლი (მხოლოდ წყალი) და ერთი დადებითი კონტროლი (DMSO-დამუშავებული წყალი).თუ ლეკვობა მოხდა და საკონტროლო ჯგუფის ლარვების 10%-ზე მეტი იღუპება, ექსპერიმენტი მეორდება.თუ საკონტროლო ჯგუფში სიკვდილიანობის მაჩვენებელი 5-10%-ს შორისაა, გამოიყენეთ Abbott-ის კორექტირების ფორმულა 68.
რამარის და სხვების მიერ აღწერილი მეთოდი.69 გამოიყენებოდა ზრდასრულთა ბიოასეისთვის Aedes aegypti-ის წინააღმდეგ აცეტონის, როგორც გამხსნელის გამოყენებით.თითოეული EO თავდაპირველად ტესტირებული იყო ზრდასრული Aedes aegypti კოღოების წინააღმდეგ 100 და 1000 ppm კონცენტრაციით.წაუსვით 2 მლ თითოეული მომზადებული ხსნარი ვატმენის ნომერზე.1 ცალი ფილტრის ქაღალდი (ზომა 12 x 15 სმ2) და აცეტონი აორთქლდეს 10 წუთის განმავლობაში.საკონტროლოდ გამოყენებული იყო ფილტრის ქაღალდი დამუშავებული მხოლოდ 2 მლ აცეტონით.აცეტონის აორთქლების შემდეგ დამუშავებული ფილტრის ქაღალდი და საკონტროლო ფილტრის ქაღალდი მოთავსებულია ცილინდრულ მილში (10 სმ სიღრმე).ათი 3-დან 4 დღის ასაკის არასისხლით მკვებავი კოღო გადაყვანილი იქნა თითოეული კონცენტრაციის სამჯერ.წინასწარი ტესტების შედეგების საფუძველზე, შემოწმებული იქნა შერჩეული ზეთების სხვადასხვა კონცენტრაცია.სიკვდილიანობა დაფიქსირდა კოღოს გათავისუფლებიდან 1 საათის, 2 საათის, 3 საათის, 4 საათის, 5 საათის, 6 საათის, 24 საათის, 48 საათის და 72 საათის შემდეგ.გამოთვალეთ LC50 მნიშვნელობები ექსპოზიციის დროისთვის 24 საათის, 48 საათისა და 72 საათის განმავლობაში.თუ საკონტროლო ლოტის სიკვდილიანობა აღემატება 20%-ს, გაიმეორეთ მთელი ტესტი.ანალოგიურად, თუ საკონტროლო ჯგუფში სიკვდილიანობის მაჩვენებელი 5%-ზე მეტია, დამუშავებული ნიმუშების შედეგების კორექტირება აბბოტის ფორმულის გამოყენებით68.
შერჩეული ეთერზეთების შემადგენელი ნაერთების გასაანალიზებლად ჩატარდა გაზის ქრომატოგრაფია (Agilent 7890A) და მასის სპექტრომეტრია (Accu TOF GCv, Jeol).GC აღჭურვილი იყო FID დეტექტორით და კაპილარული სვეტით (HP5-MS).გადამზიდავი გაზი იყო ჰელიუმი, ნაკადის სიჩქარე იყო 1 მლ/წთ.GC პროგრამა აყენებს Allium sativum-ს 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M-ზე და Ocimum Sainttum-ზე 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 - 280, ზარაფხანისთვის 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, ევკალიპტისთვის 20.60-1M-10-200-3M-30-280 და წითელისთვის ათასი ფენისთვის ისინი არიან 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
თითოეული EO-ს ძირითადი ნაერთები იდენტიფიცირებული იყო ფართობის პროცენტული მაჩვენებლის საფუძველზე, რომელიც გამოითვლება GC ქრომატოგრამიდან და მასის სპექტრომეტრიის შედეგებით (მითითებული NIST 70 სტანდარტების მონაცემთა ბაზაში).
თითოეულ EO-ში ორი ძირითადი ნაერთი შეირჩა GC-MS შედეგების საფუძველზე და შეძენილი იყო Sigma-Aldrich-ისგან 98–99% სიწმინდით შემდგომი ბიოშეფასებისთვის.ნაერთები შემოწმდა ლარვიციდულ და მოზრდილთა ეფექტურობაზე Aedes aegypti-ის წინააღმდეგ, როგორც ზემოთ იყო აღწერილი.ყველაზე ხშირად გამოყენებული სინთეზური ლარვიციდები ტამეფოსატი (Sigma Aldrich) და ზრდასრული პრეპარატი მალატიონი (Sigma Aldrich) გაანალიზდა მათი ეფექტურობის შედარების მიზნით შერჩეულ EO ნაერთებთან, იგივე პროცედურის შემდეგ.
შერჩეული ტერპენის ნაერთებისა და ტერპენის ნაერთების ორობითი ნარევები და კომერციული ორგანოფოსფატები (ტილეფოსი და მალატიონი) მომზადდა თითოეული კანდიდატი ნაერთის LC50 დოზის შერევით 1:1 თანაფარდობით.მომზადებული კომბინაციები ტესტირებულ იქნა Aedes aegypti-ის ლარვისა და ზრდასრული სტადიების შესახებ, როგორც ზემოთ იყო აღწერილი.თითოეული ბიოანალიზი შესრულდა სამმაგად თითოეული კომბინაციისთვის და სამმაგად თითოეულ კომბინაციაში არსებული ცალკეული ნაერთებისთვის.სამიზნე მწერების სიკვდილი დაფიქსირდა 24 საათის შემდეგ.გამოთვალეთ ორობითი ნარევის მოსალოდნელი სიკვდილიანობის მაჩვენებელი შემდეგი ფორმულის გამოყენებით.
სადაც E = Aedes aegypti კოღოების მოსალოდნელი სიკვდილიანობის მაჩვენებელი ორობითი კომბინაციის საპასუხოდ, ანუ კავშირი (A + B).
თითოეული ორობითი ნარევის ეფექტი მონიშნული იყო, როგორც სინერგიული, ანტაგონისტური ან არა ეფექტი, ეფუძნება χ2 მნიშვნელობას, რომელიც გამოითვლება Pavla52-ის მიერ აღწერილი მეთოდით.გამოთვალეთ χ2 მნიშვნელობა თითოეული კომბინაციისთვის შემდეგი ფორმულის გამოყენებით.
კომბინაციის ეფექტი განისაზღვრა, როგორც სინერგიული, როდესაც გამოთვლილი χ2 მნიშვნელობა აღემატებოდა ცხრილის მნიშვნელობას თავისუფლების შესაბამისი ხარისხისთვის (95% ნდობის ინტერვალი) და თუ დაფიქსირდა სიკვდილიანობა აღემატებოდა მოსალოდნელ სიკვდილიანობას.ანალოგიურად, თუ გამოთვლილი χ2 მნიშვნელობა რომელიმე კომბინაციისთვის აღემატება ცხრილის მნიშვნელობას თავისუფლების გარკვეული ხარისხით, მაგრამ დაკვირვებული სიკვდილიანობა უფრო დაბალია ვიდრე მოსალოდნელი სიკვდილიანობა, მკურნალობა განიხილება ანტაგონისტური.და თუ რომელიმე კომბინაციაში χ2-ის გამოთვლილი მნიშვნელობა ნაკლებია ცხრილის მნიშვნელობაზე თავისუფლების შესაბამის ხარისხში, კომბინაცია ითვლება არაეფექტურად.
სამი-ოთხი პოტენციურად სინერგიული კომბინაცია (100 ლარვა და 50 ლარვიციდური და ზრდასრული მწერების აქტივობა) იყო შერჩეული დიდი რაოდენობით მწერების წინააღმდეგ შესამოწმებლად.მოზარდები) გააგრძელეთ ზემოთ.ნარევებთან ერთად, შერჩეულ ნარევებში არსებული ცალკეული ნაერთები ასევე შემოწმებული იქნა თანაბარი რაოდენობის Aedes aegypti ლარვებზე და მოზრდილებში.კომბინირებული თანაფარდობა არის ერთი კანდიდატი ნაერთის LC50 დოზის ერთი ნაწილი და მეორე შემადგენელი ნაერთის ნაწილი LC50 დოზა.ზრდასრულთა აქტივობის ბიოანალიზში, შერჩეული ნაერთები იხსნება გამხსნელ აცეტონში და გამოიყენება 1300 სმ3 ცილინდრული პლასტმასის კონტეინერში გახვეულ ფილტრის ქაღალდზე.აცეტონი აორთქლდა 10 წუთის განმავლობაში და მოზარდები გაათავისუფლეს.ანალოგიურად, ლარვიციდულ ბიოანალიზში, LC50 კანდიდატი ნაერთების დოზები ჯერ იხსნება DMSO-ს თანაბარ მოცულობებში და შემდეგ შერეული 1300 cc პლასტმასის კონტეინერებში შენახულ 1 ლიტრ წყალში და ლარვები გამოუშვეს.
71 დაფიქსირებული სიკვდილიანობის მონაცემების ალბათური ანალიზი ჩატარდა SPSS (ვერსია 16) და Minitab პროგრამული უზრუნველყოფის გამოყენებით LC50 მნიშვნელობების გამოსათვლელად.
გამოქვეყნების დრო: ივლის-01-2024