ფუნგიციდის დანამატი ამცირებს წმინდა ენერგიის მოპოვებას და მიკრობიომის მრავალფეროვნებას მარტოხელა ქვისა ფუტკრებში.

გმადლობთ Nature.com-ის მონახულებისთვის.ბრაუზერის ვერსიას, რომელსაც იყენებთ, აქვს შეზღუდული CSS მხარდაჭერა.საუკეთესო შედეგისთვის, გირჩევთ გამოიყენოთ თქვენი ბრაუზერის უფრო ახალი ვერსია (ან გამორთოთ თავსებადობის რეჟიმი Internet Explorer-ში).იმავდროულად, მუდმივი მხარდაჭერის უზრუნველსაყოფად, ჩვენ ვაჩვენებთ საიტს სტილის ან JavaScript-ის გარეშე.
ფუნგიციდები ხშირად გამოიყენება ხის ნაყოფის ყვავილობის დროს და შეიძლება საფრთხე შეუქმნას მწერების დამბინძურებლებს.თუმცა, ცოტა რამ არის ცნობილი იმის შესახებ, თუ როგორ რეაგირებენ არაფუტკრის დამბინძურებლები (მაგ., მარტოხელა ფუტკარი, ოსმიის რქა) კონტაქტურ და სისტემურ ფუნგიციდებზე, რომლებიც ჩვეულებრივ გამოიყენება ვაშლებზე ყვავილობის დროს.ცოდნის ეს ხარვეზი ზღუდავს მარეგულირებელ გადაწყვეტილებებს, რომლებიც განსაზღვრავენ უსაფრთხო კონცენტრაციებს და ფუნგიციდის შესხურების ვადებს.ჩვენ შევაფასეთ ორი კონტაქტური ფუნგიციდის (კაპტანი და მანკოზები) და ოთხი შრეთაშორისი/ფიტოსისტემური ფუნგიციდის (ციპროციკლინი, მიკლობუტანილი, პიროსტრობინი და ტრიფლოქსტრობინი) ეფექტი.ზემოქმედება ლარვების წონის მატებაზე, გადარჩენაზე, სქესთა თანაფარდობაზე და ბაქტერიების მრავალფეროვნებაზე.შეფასება ჩატარდა ქრონიკული ორალური ბიოასეის გამოყენებით, რომელშიც მტვერი მკურნალობდა სამ დოზად, საველე გამოყენებისთვის ამჟამად რეკომენდებული დოზის საფუძველზე (1X), ნახევარი დოზა (0.5X) და დაბალი დოზა (0.1X).მანკოზებისა და პირიტიზოლინის ყველა დოზა მნიშვნელოვნად ამცირებს სხეულის წონას და ლარვების გადარჩენას.შემდეგ ჩვენ დავადგინეთ 16S გენის თანმიმდევრობა, რათა დაეხასიათებინა მანკოზების ლარვის ბაქტერია, ფუნგიციდი, რომელიც პასუხისმგებელია უმაღლეს სიკვდილობაზე.ჩვენ აღმოვაჩინეთ, რომ ბაქტერიების მრავალფეროვნება და სიმრავლე მნიშვნელოვნად შემცირდა ლარვებში, რომლებიც იკვებებოდნენ მანკოზებით დამუშავებული მტვრით.ჩვენი ლაბორატორიული შედეგები მიუთითებს, რომ ზოგიერთი ამ ფუნგიციდის შესხურება ყვავილობის დროს განსაკუთრებით საზიანოა O. cornifrons-ის ჯანმრთელობისთვის.ეს ინფორმაცია შესაბამისია მომავალი მენეჯმენტის გადაწყვეტილებებისთვის ხეხილის დამცავი პროდუქტების მდგრადი გამოყენების შესახებ და ემსახურება როგორც დამბინძურებლების დაცვას მიმართული მარეგულირებელი პროცესების საფუძველს.
მარტოხელა ფუტკარი Osmia cornifrons (Hymenoptera: Megachilidae) შეერთებულ შტატებში იაპონიიდან შემოიტანეს 1970-იანი წლების ბოლოს და 1980-იანი წლების დასაწყისში და მას შემდეგ ეს სახეობა მნიშვნელოვან დამბინძურებელ როლს თამაშობს მართულ ეკოსისტემებში.ამ ფუტკრის ნატურალიზებული პოპულაციები არის დაახლოებით 50 სახეობის ველური ფუტკრის ნაწილი, რომლებიც ავსებენ ფუტკრებს, რომლებიც აბინძურებენ ნუშისა და ვაშლის ბაღებს შეერთებულ შტატებში2,3.მეისონ ფუტკრები მრავალი გამოწვევის წინაშე დგანან, მათ შორის ჰაბიტატის ფრაგმენტაცია, პათოგენები და პესტიციდები3,4.ინსექტიციდებს შორის ფუნგიციდები ამცირებენ ენერგიის მოპოვებას, საკვების მოპოვებას5 და სხეულის კონდიცირებას6,7.მიუხედავად იმისა, რომ ბოლო კვლევები ვარაუდობენ, რომ მეისონ ფუტკრების ჯანმრთელობაზე პირდაპირ გავლენას ახდენს კომენსალური და ექტობაქტური მიკროორგანიზმები, 8,9 რადგან ბაქტერიებსა და სოკოებს შეუძლიათ გავლენა მოახდინონ კვებაზე და იმუნურ პასუხებზე, ფუნგიციდების ზემოქმედების ზემოქმედება მეისონის ფუტკრების მიკრობების მრავალფეროვნებაზე ახლახან იწყება. შეისწავლა.
სხვადასხვა ეფექტის ფუნგიციდებს (კონტაქტური და სისტემური) ასხურებენ ბაღებში ყვავილობის წინ და ყვავილობის დროს ისეთი დაავადებების სამკურნალოდ, როგორიცაა ვაშლის ნაწიბური, მწარე ლპობა, ყავისფერი ლპობა და ჭრაქი10,11.ფუნგიციდები დამბინძურებლებისთვის უვნებელია, ამიტომ მებოსტნეებს ურჩევენ ყვავილობის პერიოდში;ფუტკრების მიერ ამ ფუნგიციდების ზემოქმედება და მიღება შედარებით კარგად არის ცნობილი, რადგან ეს არის პესტიციდების რეგისტრაციის პროცესის ნაწილი აშშ-ს გარემოს დაცვის სააგენტოს და მრავალი სხვა ეროვნული მარეგულირებელი სააგენტოს მიერ12,13,14.თუმცა, ფუნგიციდების ზემოქმედება არა ფუტკრებზე ნაკლებადაა ცნობილი, რადგან ისინი არ მოითხოვება შეერთებულ შტატებში მარკეტინგული ავტორიზაციის შეთანხმებით15.გარდა ამისა, ზოგადად არ არსებობს სტანდარტიზებული პროტოკოლები ცალკეული ფუტკრების ტესტირებისთვის16,17 და რთულია კოლონიების შენარჩუნება, რომლებიც უზრუნველყოფენ ფუტკრებს ტესტირებისთვის18.ევროპასა და აშშ-ში სულ უფრო ხშირად ტარდება სხვადასხვა მართვადი ფუტკრის ცდები ველურ ფუტკრებზე პესტიციდების ზემოქმედების შესასწავლად და ახლახან შემუშავდა O. cornifrons19 სტანდარტიზებული პროტოკოლები.
რქოვანი ფუტკარი მონოციტებია და კომერციულად გამოიყენება კობრის კულტურებში, როგორც თაფლის ფუტკრის დანამატი ან შემცვლელი.ეს ფუტკარი ჩნდება მარტიდან აპრილამდე, ნაადრევი მამრები მდედრებზე სამი-ოთხი დღით ადრე ჩნდებიან.შეჯვარების შემდეგ, მდედრი აქტიურად აგროვებს მტვერს და ნექტარს, რათა უზრუნველყოს შთამომავლობის უჯრედების სერია მილაკოვანი ბუდის ღრუში (ბუნებრივი ან ხელოვნური)1,20.კვერცხებს დებენ უჯრედების შიგნით მტვერზე;შემდეგ ქალი აშენებს თიხის კედელს მომდევნო უჯრედის მომზადებამდე.პირველი ასაკის ლარვები ჩაკეტილია ქორიონში და იკვებება ემბრიონის სითხეებით.მეორედან მეხუთე სტადიიდან (პრეპუპა) ლარვები იკვებებიან მტვერით22.მას შემდეგ, რაც მტვრის მარაგი მთლიანად ამოიწურება, ლარვები ქმნიან ქოქოსებს, ჭუჭყიან და ზრდასრულები გამოდიან იმავე სანაყოფე ოთახში, ჩვეულებრივ, ზაფხულის ბოლოს20,23.მოზრდილები ჩნდებიან მომდევნო გაზაფხულზე.ზრდასრულთა გადარჩენა დაკავშირებულია ენერგიის წმინდა მატებასთან (წონის მატებასთან) საკვების მიღებაზე დაყრდნობით.ამრიგად, მტვრის კვებითი ხარისხი, ისევე როგორც სხვა ფაქტორები, როგორიცაა ამინდი ან პესტიციდების ზემოქმედება, გადარჩენისა და ჯანმრთელობის განმსაზღვრელია24.
ყვავილობის წინ გამოყენებული ინსექტიციდები და ფუნგიციდები შეუძლიათ მცენარის სისხლძარღვებში გადაადგილება სხვადასხვა ხარისხით, ტრანსლამინურიდან (მაგ., შეუძლიათ გადავიდნენ ფოთლების ზედა ზედაპირიდან ქვედა ზედაპირზე, როგორც ზოგიერთი ფუნგიციდი) 25 ჭეშმარიტად სისტემურ ეფექტებამდე., რომელსაც შეუძლია გვირგვინში შეაღწიოს ფესვებიდან, შეიძლება შევიდეს ვაშლის ყვავილების ნექტარში26, სადაც მათ შეუძლიათ მოკვლა ზრდასრული O. cornifrons27.ზოგიერთი პესტიციდი ასევე ირეცხება მტვერში, რაც გავლენას ახდენს სიმინდის ლარვების განვითარებაზე და იწვევს მათ სიკვდილს19.სხვა კვლევებმა აჩვენა, რომ ზოგიერთ ფუნგიციდს შეუძლია მნიშვნელოვნად შეცვალოს დაკავშირებული სახეობების ბუდეების ქცევა O. lignaria28.გარდა ამისა, ლაბორატორიულმა და საველე კვლევებმა პესტიციდების ზემოქმედების სცენარების სიმულაციაზე (ფუნგიციდების ჩათვლით) აჩვენა, რომ პესტიციდები უარყოფითად მოქმედებს ფიზიოლოგიაზე 22 მორფოლოგია 29 და თაფლის ფუტკრისა და ზოგიერთი მარტოხელა ფუტკრის გადარჩენაზე.ყვავილობის დროს პირდაპირ ღია ყვავილებზე დაყენებულმა სხვადასხვა ფუნგიციდულმა სპრეებმა შეიძლება დააბინძუროს მოზრდილების მიერ ლარვის განვითარებისთვის შეგროვებული მტვერი, რომლის ეფექტი ჯერ კიდევ შესასწავლია30.
სულ უფრო და უფრო აღიარებულია, რომ ლარვების განვითარებაზე გავლენას ახდენს საჭმლის მომნელებელი სისტემის მტვერი და მიკრობული საზოგადოებები.ფუტკრის მიკრობიომი გავლენას ახდენს ისეთ პარამეტრებზე, როგორიცაა სხეულის მასა31, მეტაბოლური ცვლილებები22 და მგრძნობელობა პათოგენების მიმართ32.წინა კვლევებმა შეისწავლა განვითარების სტადიის, საკვები ნივთიერებების და გარემოს გავლენა მარტოხელა ფუტკრების მიკრობიომზე.ამ კვლევებმა გამოავლინა მსგავსება ლარვისა და მტვრის მიკრობიომების სტრუქტურასა და სიმრავლეში33, ისევე როგორც ყველაზე გავრცელებული ბაქტერიული გვარების Pseudomonas და Delftia, მარტოხელა ფუტკრის სახეობებს შორის.თუმცა, მიუხედავად იმისა, რომ ფუნგიციდები დაკავშირებულია ფუტკრის ჯანმრთელობის დაცვის სტრატეგიებთან, ფუნგიციდების ზემოქმედება ლარვის მიკრობიოტაზე პირდაპირი პერორალური ზემოქმედების გზით შეუსწავლელი რჩება.
ამ კვლევამ გამოსცადა შეერთებულ შტატებში ხის ნაყოფზე გამოსაყენებლად რეგისტრირებული ექვსი ფუნგიციდის რეალური დოზების ეფექტი, მათ შორის კონტაქტური და სისტემური ფუნგიციდები, რომლებიც პერორალურად შეჰყავდათ სიმინდის რქის ჭიის ლარვას დაბინძურებული საკვებიდან.ჩვენ აღმოვაჩინეთ, რომ კონტაქტურმა და სისტემურმა ფუნგიციდებმა შეამცირეს ფუტკრის სხეულის წონის მატება და გაზარდა სიკვდილიანობა, ყველაზე მძიმე ეფექტები ასოცირდება მანკოზებთან და პირითიოპიდთან.შემდეგ ჩვენ შევადარეთ ლარვების მიკრობული მრავალფეროვნება, რომლებიც იკვებებიან მანკოზებით დამუშავებული მტვრის დიეტით მათთან, რომლებიც იკვებებოდნენ საკონტროლო დიეტაზე.ჩვენ განვიხილავთ პოტენციურ მექანიზმებს, რომლებიც ემყარება სიკვდილიანობას და მავნებლებისა და დამბინძურებლების ინტეგრირებული მართვის (IPPM)36 პროგრამებზე გავლენას.
ზრდასრული O. cornifrons გამოზამთრებული ქოქოსებში მიღებულ იქნა ხილის კვლევის ცენტრიდან, Biglerville, PA და ინახებოდა -3-დან 2°C-მდე (±0.3°C).ექსპერიმენტამდე (სულ 600 კოკონი).2022 წლის მაისში, 100 O. cornifrons ქოქოსი ყოველდღიურად გადაჰყავდათ პლასტმასის ჭიქებში (50 ქოქოსი თითო ჭიქა, DI 5 სმ × 15 სმ სიგრძის) და ხელსახოცები მოათავსეს ჭიქების შიგნით, რათა ხელი შეუწყოს გახსნას და უზრუნველყოს საღეჭი სუბსტრატი, რაც ამცირებს სტრესს ქვაზე. ფუტკარი37.მოათავსეთ ორი პლასტმასის ჭიქის შემცველი ქოქოსი მწერების გალიაში (30 × 30 × 30 სმ, BugDorm MegaView Science Co. Ltd., ტაივანი) 10 მლ ფიდერებით, რომლებიც შეიცავს 50% საქაროზის ხსნარს და შეინახეთ ოთხი დღის განმავლობაში დახურვისა და შეჯვარების უზრუნველსაყოფად.23°C, ფარდობითი ტენიანობა 60%, ფოტოპერიოდი 10 ლ (დაბალი ინტენსივობა): 14 დღე.100 შეწყვილებული მდედრი და მამალი ყოველ დილით ექვსი დღის განმავლობაში (დღეში 100) გაათავისუფლეს ორ ხელოვნურ ბუდეში ვაშლის პიკის ყვავილობის დროს (ხაფანგის ბუდე: სიგანე 33,66 × სიმაღლე 30,48 × სიგრძე 46,99 სმ; დამატებითი სურათი 1).განთავსებულია პენსილვანიის შტატის არბორეტუმში, ალუბლის (Prunus cerasus 'Eubank' Sweet Cherry Pie™), ატმის (Prunus persica 'Contender'), Prunus persica 'PF 27A' Flamin Fury®), მსხლის (Pyrus perifolia 'Olympic', Pyrus) მახლობლად. perifolia ' Shinko', Pyrus perifolia 'Shinseiki'), coronaria ვაშლის ხე (Malus coronaria) და მრავალი ჯიშის ვაშლის ხე (Malus coronaria, Malus), შინაური ვაშლის ხე 'Co-op 30' Enterprise™, Malus ვაშლის ხე 'Co- Op 31′ Winecrisp™, ბეგონია „თავისუფლება“, ბეგონია „ოქროს დელიშისი“, ბეგონია „ნოვა ჯაშუში“).თითოეული ლურჯი პლასტმასის ფრინველის სახლი ჯდება ორი ხის ყუთის თავზე.თითოეული ბუდის ყუთი შეიცავდა 800 ცარიელ კრაფტის ქაღალდის მილს (სპირალურად ღია, 0.8 სმ ID × 15 სმ ლ) (Jonesville Paper Tube Co., მიჩიგანი) ჩასმული გაუმჭვირვალე ცელოფნის მილებში (0.7 OD იხილეთ პლასტიკური სანთლები (T-1X სანთლები) უზრუნველყოფს ბუდეების ადგილს. .
ორივე ბუდე ყუთი აღმოსავლეთისაკენ იყო მიმართული და დაფარული იყო მწვანე პლასტმასის ბაღის ფარიკაობით (Everbilt მოდელი #889250EB12, გახსნის ზომა 5 × 5 სმ, 0,95 მ × 100 მ) მღრღნელებისა და ფრინველების წვდომის თავიდან ასაცილებლად და მოთავსებული იყო ნიადაგის ზედაპირზე ბუდის ყუთის ნიადაგის გვერდით. ყუთები.ბუდის ყუთი (დამატებითი სურათი 1a).სიმინდის კვერცხს ყოველდღიურად აგროვებდნენ ბუდეებიდან 30 მილის შეგროვებით და ლაბორატორიაში ტრანსპორტირებით.მაკრატლის გამოყენებით, გააკეთეთ ჭრილი მილის ბოლოს, შემდეგ დაშალეთ სპირალური მილი, რათა გამოაშკარავოთ ნაყოფის უჯრედები.ცალკეული კვერცხები და მათი მტვერი ამოღებულ იქნა მოხრილი სპატულის გამოყენებით (Microslide tool kit, BioQuip Products Inc., California).კვერცხები ინკუბირებული იყო ნესტიან ფილტრის ქაღალდზე და მოათავსეს პეტრის ჭურჭელში 2 საათის განმავლობაში ჩვენს ექსპერიმენტებში გამოყენებამდე (დამატებითი სურათი 1b-d).
ლაბორატორიაში ჩვენ შევაფასეთ ექვსი ფუნგიციდის ორალური ტოქსიკურობა, რომლებიც გამოიყენება ვაშლის ყვავილობამდე და მის დროს სამი კონცენტრაციით (0.1X, 0.5X და 1X, სადაც 1X არის ნიშანი, რომელიც გამოიყენება 100 გალონ წყალზე/აკრი. მაღალი საველე დოზა = კონცენტრაცია. მინდორში)., ცხრილი 1).თითოეული კონცენტრაცია განმეორდა 16-ჯერ (n = 16).ორი კონტაქტური ფუნგიციდი (ცხრილი S1: mancozeb 2696.14 ppm და კაპტანი 2875.88 ppm) და ოთხი სისტემური ფუნგიციდი (ცხრილი S1: პირითიოსტრობინი 250.14 ppm; ტრიფლოქსისტრობინი 110.06 ppm; მიკლობუტანილი აზოლი .800 ppm ხილი, ბოსტნეული და დეკორატიული კულტურები .მტვრის ჰომოგენიზაცია მოვახდინეთ საფქვავის გამოყენებით, გადავიტანეთ 0,20 გ ჭაბურღილში (24 ჭაბურღილი Falcon Plate) და დავამატეთ და ავურიეთ 1 μL ფუნგიციდის ხსნარი, რათა ჩამოყალიბდეს პირამიდული მტვერი 1 მმ სიღრმის ჭებით, რომელშიც კვერცხები მოთავსდა.მოათავსეთ მინი სპატულის გამოყენებით (დამატებითი სურათი 1c,d).ფალკონის ფირფიტები ინახებოდა ოთახის ტემპერატურაზე (25°C) და 70% ფარდობით ტენიანობაზე.ჩვენ შევადარეთ ისინი საკონტროლო ლარვებს, რომლებიც იკვებებიან სუფთა წყლით დამუშავებული მტვრის ერთგვაროვანი დიეტით.ჩვენ ვაფიქსირებდით სიკვდილიანობას და ვზომავდით ლარვის წონას ყოველ მეორე დღეს, სანამ ლარვები არ მიაღწევდნენ პრეპუპალურ ასაკს ანალიტიკური ბალანსის გამოყენებით (Fisher Scientific, სიზუსტე = 0.0001 გ).საბოლოოდ, სქესთა თანაფარდობა შეფასდა 2,5 თვის შემდეგ ქოქოსის გახსნით.
დნმ იქნა ამოღებული მთლიანი O. cornifrons ლარვებიდან (n = 3 მკურნალობის პირობებში, მანკოზებით დამუშავებული და არანამკურნალევი მტვერი) და ჩვენ ჩავატარეთ მიკრობული მრავალფეროვნების ანალიზები ამ ნიმუშებზე, განსაკუთრებით იმიტომ, რომ მანკოზებში ყველაზე მაღალი სიკვდილიანობა დაფიქსირდა ლარვებში.MnZn-ის მიღება.დნმ გაძლიერდა, გაიწმინდა DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead დნმ-ის ნაკრების გამოყენებით (Zymo Research, Irvine, CA) და დახარისხდა (600 ციკლი) Illumina® MiSeq™-ზე v3 ნაკრების გამოყენებით.ბაქტერიული 16S რიბოსომური რნმ გენების მიზანმიმართული თანმიმდევრობა განხორციელდა Quick-16S™ NGS ბიბლიოთეკის მოსამზადებელი ნაკრების გამოყენებით (Zymo Research, Irvine, CA) პრაიმერების გამოყენებით, რომლებიც მიზნად ისახავს 16S rRNA გენის V3-V4 რეგიონს.გარდა ამისა, 18S თანმიმდევრობა განხორციელდა 10% PhiX ჩართვის გამოყენებით და გაძლიერება განხორციელდა პრაიმერის წყვილის 18S001 და NS4 გამოყენებით.
იმპორტი და დაამუშავეთ დაწყვილებული წაკითხვები39 QIIME2 მილსადენის გამოყენებით (v2022.11.1).ეს წაკითხული იყო ამოჭრილი და შერწყმული და ქიმერული თანმიმდევრობები ამოიღეს DADA2 მოდულის გამოყენებით QIIME2-ში (qiime dada2 ხმაურის დაწყვილება)40.16S და 18S კლასის დავალებები შესრულდა ობიექტის კლასიფიკატორის დანამატის Classify-sklearn და წინასწარ მომზადებული artifact silva-138-99-nb-კლასიფიკატორის გამოყენებით.
ყველა ექსპერიმენტული მონაცემი შემოწმდა ნორმალურობაზე (Shapiro-Wilks) და ვარიაციების ჰომოგენურობაზე (ლევენის ტესტი).იმის გამო, რომ მონაცემთა ნაკრები არ აკმაყოფილებდა პარამეტრული ანალიზის დაშვებებს და ტრანსფორმაციამ ვერ მოახდინა ნარჩენების სტანდარტიზაცია, ჩვენ ჩავატარეთ არაპარამეტრული ორმხრივი ANOVA (კრუსკალ-უოლისი) ორი ფაქტორით [დრო (სამი ფაზა 2, 5 და 8 დღე. დროის წერტილები) და ფუნგიციდი] მკურნალობის ეფექტის შესაფასებლად ლარვის ახალ წონაზე, შემდეგ ჩატარდა პოსტ-ჰოკ არაპარამეტრული წყვილ-წყვილური შედარება Wilcoxon ტესტის გამოყენებით.ჩვენ გამოვიყენეთ განზოგადებული ხაზოვანი მოდელი (GLM) პუასონის განაწილებით, რათა შევადაროთ ფუნგიციდების ეფექტი გადარჩენაზე სამი ფუნგიციდის კონცენტრაციაზე41,42.დიფერენციალური სიმრავლის ანალიზისთვის, ამპლიკონის თანმიმდევრობის ვარიანტების (ASVs) რაოდენობა კოლაფსირებული იყო გვარის დონეზე.დიფერენციალური სიმრავლის შედარება ჯგუფებს შორის 16S (გვარის დონე) და 18S ფარდობითი სიმრავლის გამოყენებით განხორციელდა განზოგადებული დანამატის მოდელის გამოყენებით პოზიციისთვის, მასშტაბისთვის და ფორმისთვის (GAMLSS) ბეტა ნულოვანი გაბერილი (BEZI) ოჯახის განაწილებით, რომლებიც მოდელირებული იყო მაკროზე. .მიკრობიომში R43 (v1.1).1).დიფერენციალური ანალიზის წინ ამოიღეთ მიტოქონდრიული და ქლოროპლასტის სახეობები.18S-ის სხვადასხვა ტაქსონომიური დონის გამო, დიფერენციალური ანალიზებისთვის გამოყენებული იყო თითოეული ტაქსონის მხოლოდ ყველაზე დაბალი დონე.ყველა სტატისტიკური ანალიზი ჩატარდა R (v. 3.4.3., CRAN პროექტი) გამოყენებით (Team 2013).
მანკოზების, პირთიოსტრობინის და ტრიფლოქსისტრობინის ზემოქმედებამ მნიშვნელოვნად შეამცირა სხეულის წონის მომატება O. cornifrons-ში (ნახ. 1).ეს ეფექტები თანმიმდევრულად დაფიქსირდა სამივე შეფასებული დოზისთვის (ნახ. 1a–c).ციკლოსტრობინმა და მიკლობუტანილმა მნიშვნელოვნად არ შეამცირა ლარვების წონა.
ღეროს ლარვის საშუალო ახალი წონა გაზომილია სამ დროს ოთხ დიეტურ მკურნალობაში (ერთგვაროვანი მტვრის საკვები + ფუნგიციდი: კონტროლი, 0.1X, 0.5X და 1X დოზები).(ა) დაბალი დოზა (0.1X): პირველი დროის წერტილი (დღე 1): χ2: 30.99, DF = 6;P <0,0001, მეორე დროის წერტილი (დღე 5): 22,83, DF = 0,0009;მესამეჯერ;წერტილი (დღე 8): χ2: 28.39, DF = 6;(ბ) ნახევარი დოზა (0.5X): პირველი დრო (დღე 1): χ2: 35.67, DF = 6;P <0.0001, მეორე დროის წერტილი (პირველი დღე).): χ2: 15.98, DF = 6;P = 0,0090;მესამე დროის წერტილი (დღე 8) χ2: 16.47, DF = 6;(გ) ლოკაცია ან სრული დოზა (1X): პირველი დროის წერტილი (დღე 1) χ2: 20.64, P = 6;P = 0,0326, მეორე დროის წერტილი (დღე 5): χ2: 22,83, DF = 6;P = 0.0009;მესამე დროის წერტილი (დღე 8): χ2: 28.39, DF = 6;დისპერსიის არაპარამეტრული ანალიზი.ზოლები წარმოადგენს წყვილთა შედარების საშუალო ± SE-ს (α = 0,05) (n = 16) *P ≤ 0,05, **P ≤ 0,001, ***P ≤ 0,0001.
ყველაზე დაბალი დოზით (0.1X), ლარვის სხეულის წონა შემცირდა 60%-ით ტრიფლოქსისტრობინით, 49%-ით მანკოზებით, 48%-ით მიკლობუტანილით და 46%-ით პირითისტრობინით (ნახ. 1a).საველე დოზის ნახევარზე (0.5X) ზემოქმედებისას მანკოზების ლარვების სხეულის წონა შემცირდა 86%-ით, პირითიოსტრობინით 52%-ით და ტრიფლოქსისტრობინით 50%-ით (ნახ. 1ბ).მანკოზების სრულ საველე დოზამ (1X) შეამცირა ლარვის წონა 82%-ით, პირითიოსტრობინი 70%-ით და ტრიფლოქსისტრობინი, მიკლობუტანილი და სანგარდი დაახლოებით 30%-ით (ნახ. 1c).
სიკვდილიანობა ყველაზე მაღალი იყო ლარვებს შორის, რომლებიც იკვებებოდნენ მანკოზებით დამუშავებული მტვერით, რასაც მოჰყვა პირითიოსტრობინი და ტრიფლოქსისტრობინი.სიკვდილიანობა გაიზარდა მანკოზების და პირიტიზოლინის დოზების გაზრდით (ნახ. 2; ცხრილი 2).თუმცა, სიმინდის ხვრელის სიკვდილიანობა მხოლოდ ოდნავ გაიზარდა ტრიფლოქსისტრობინის კონცენტრაციის მატებასთან ერთად;ციპროდინილი და კაპტანი მნიშვნელოვნად არ ზრდიდნენ სიკვდილიანობას საკონტროლო მკურნალობასთან შედარებით.
მტვრის ბუზის ლარვების სიკვდილიანობა შედარებულია ექვსი სხვადასხვა ფუნგიციდით ინდივიდუალურად დამუშავებული ყვავილის მტვრის მიღების შემდეგ.მანკოზები და პენტოპირამიდი უფრო მგრძნობიარე იყო სიმინდის ქუთუთოების ორალური ზემოქმედების მიმართ (GLM: χ = 29,45, DF = 20, P = 0,0059) (ხაზი, დახრილობა = 0,29, P <0,001; ფერდობა = 0,24, P <0).
საშუალოდ, ყველა მკურნალობაში, პაციენტების 39.05% იყო ქალი და 60.95% მამაკაცი.საკონტროლო მკურნალობას შორის, ქალების წილი იყო 40% როგორც დაბალი დოზის (0.1X) და ნახევარდოზის (0.5X) კვლევებში და 30% საველე დოზის (1X) კვლევებში.0,1X დოზით, მტვრით ნაკვებ ლარვებს შორის, რომლებიც მკურნალობდნენ მანკოზებით და მიკლობუტანილით, მოზრდილების 33,33% იყო მდედრი, მოზრდილების 22% ქალი, ზრდასრული ლარვების 44% ქალი, ზრდასრული ლარვების 44% ქალი.მდედრობითი სქესის, ზრდასრული ლარვების 41% იყო მდედრი, ხოლო კონტროლი იყო 31% (ნახ. 3a).0.5-ჯერ მეტი დოზით, ზრდასრული ჭიების 33% მანკოზებისა და პირითიოსტრობინის ჯგუფში იყო ქალი, 36% ტრიფლოქსტრობინის ჯგუფში, 41% მიკლობუტანილის ჯგუფში და 46% ციპროსტრობინის ჯგუფში.ეს მაჩვენებელი ჯგუფში 53% იყო.კაპტანის ჯგუფში და 38% საკონტროლო ჯგუფში (ნახ. 3ბ).1X დოზით, მანკოზების ჯგუფის 30% იყო ქალები, 36% პირითიოსტრობინის ჯგუფიდან, 44% ტრიფლოქსტრობინის ჯგუფიდან, 38% მიკლობუტანილის ჯგუფიდან, საკონტროლო ჯგუფის 50% იყო ქალები - 38.5% (ნახ. 3c) .
ლარვის სტადიის ფუნგიციდის ზემოქმედების შემდეგ მდედრობითი და მამრობითი მტვრიანების პროცენტი.(ა) დაბალი დოზა (0.1X).(ბ) ნახევარი დოზა (0.5X).(გ) საველე დოზა ან სრული დოზა (1X).
16S თანმიმდევრობის ანალიზმა აჩვენა, რომ ბაქტერიული ჯგუფი განსხვავდებოდა ლარვებს შორის, რომლებიც იკვებებოდნენ მანკოზებით დამუშავებული მტვრით და ლარვები, რომლებიც იკვებებოდნენ დაუმუშავებელი მტვრით (ნახ. 4a).მტვრით იკვებებული დაუმუშავებელი ლარვების მიკრობული ინდექსი უფრო მაღალი იყო, ვიდრე მანკოზებით დამუშავებული მტვრით გამოკვებული ლარვების (ნახ. 4ბ).მიუხედავად იმისა, რომ ჯგუფებს შორის სიმდიდრის დაფიქსირებული სხვაობა არ იყო სტატისტიკურად მნიშვნელოვანი, ის მნიშვნელოვნად დაბალი იყო ვიდრე დაფიქსირებული ლარვებისთვის, რომლებიც იკვებებიან დაუმუშავებელი მტვრისგან (ნახ. 4c).შედარებითი სიმრავლე აჩვენა, რომ საკონტროლო მტვრით იკვებებული ლარვების მიკრობიოტა უფრო მრავალფეროვანია, ვიდრე მანკოზებით დამუშავებული ლარვებით იკვებებული ლარვები (ნახ. 5ა).აღწერილობითმა ანალიზმა გამოავლინა 28 გვარის არსებობა საკონტროლო და მანკოზებით დამუშავებულ ნიმუშებში (ნახ. 5ბ).c ანალიზმა 18S თანმიმდევრობის გამოყენებით არ გამოავლინა მნიშვნელოვანი განსხვავებები (დამატებითი სურათი 2).
SAV პროფილები დაფუძნებული 16S თანმიმდევრობებზე შედარებული იყო შენონის სიმდიდრესთან და დაფიქსირდა სიმდიდრე ფენის დონეზე.(ა) ძირითადი კოორდინატების ანალიზი (PCoA) საერთო მიკრობული საზოგადოების სტრუქტურაზე დაფუძნებული არანამკურნალევი მტვერით კვებაზე ან საკონტროლო (ლურჯი) და მანკოზებით კვებაზე (ფორთოხლისფერი) ლარვებში.თითოეული მონაცემთა წერტილი წარმოადგენს ცალკე ნიმუშს.PCoA გამოთვლილი იყო ბრეი-კერტისის მანძილის გამოყენებით t მრავალვარიანტული განაწილების.ოვლები წარმოადგენს 80% ნდობის დონეს.(ბ) Boxplot, ნედლი შენონის სიმდიდრის მონაცემები (ქულები) და გ.შესამჩნევი სიმდიდრე.Boxplots აჩვენებს ველებს მედიანური ხაზისთვის, ინტერკვარტილური დიაპაზონისთვის (IQR) და 1.5 × IQR (n = 3).
მანკოზებით დამუშავებული და დაუმუშავებელი მტვერით იკვებება ლარვების მიკრობული თემების შემადგენლობა.(ა) მიკრობული გვარების შედარებითი სიმრავლე იკითხება ლარვებში.(ბ) გამოვლენილი მიკრობული თემების თერმული რუკა.დელფტია (შანსების კოეფიციენტი (OR) = 0,67, P = 0,0030) და ფსევდომონასი (OR = 0,3, P = 0,0074), მიკრობაქტერია (OR = 0,75, P = 0,0617) (OR = 1,5, P = 0,0060);სითბოს რუქის რიგები დაჯგუფებულია კორელაციური მანძილისა და საშუალო კავშირის გამოყენებით.
ჩვენი შედეგები აჩვენებს, რომ კონტაქტური (მანკოზები) და სისტემური (პიროსტრობინი და ტრიფლოქსტრობინი) ფუნგიციდების ორალური ზემოქმედება, რომლებიც ფართოდ გამოიყენება ყვავილობის პერიოდში, მნიშვნელოვნად ამცირებს წონის მატებას და ზრდის სიმინდის ლარვების სიკვდილიანობას.გარდა ამისა, მანკოზებმა მნიშვნელოვნად შეამცირა მიკრობიომის მრავალფეროვნება და სიმდიდრე პრეპაპალურ სტადიაზე.მიკლობუტანილი, კიდევ ერთი სისტემური ფუნგიციდი, მნიშვნელოვნად ამცირებს ლარვების სხეულის წონის მატებას სამივე დოზის მიღებისას.ეს ეფექტი აშკარა იყო მეორე (დღე 5) და მესამე (დღე 8) დროის წერტილებში.ამის საპირისპიროდ, ციპროდინილი და კაპტანი მნიშვნელოვნად არ ამცირებდნენ წონის მატებას ან გადარჩენას საკონტროლო ჯგუფთან შედარებით.ჩვენი ცოდნით, ეს ნამუშევარი პირველია, რომელიც განსაზღვრავს სხვადასხვა ფუნგიციდების საბადოების ეფექტებს, რომლებიც გამოიყენება სიმინდის კულტურების დასაცავად მტვრის პირდაპირი ზემოქმედებით.
ყველა ფუნგიციდური მკურნალობა მნიშვნელოვნად ამცირებს სხეულის წონის მატებას საკონტროლო მკურნალობასთან შედარებით.მანკოზებს ყველაზე დიდი გავლენა ჰქონდა ლარვების სხეულის წონის მატებაზე საშუალოდ 51%-ით შემცირებით, რასაც მოჰყვა პირითიოსტრობინი.თუმცა, სხვა კვლევებში არ არის მოხსენებული ფუნგიციდების საველე დოზების გვერდითი ეფექტები ლარვის სტადიაზე44.მიუხედავად იმისა, რომ დითიოკარბამატის ბიოციდებს აქვთ დაბალი მწვავე ტოქსიკურობა45, ეთილენის ბისდითიოკარბამატებს (EBDCS), როგორიცაა მანკოზები, შეუძლიათ შარდოვანას ეთილენ სულფიდამდე დეგრადაცია.სხვა ცხოველებზე მისი მუტაგენური ეფექტის გათვალისწინებით, ეს დეგრადაციის პროდუქტი შეიძლება იყოს პასუხისმგებელი დაკვირვებულ ეფექტებზე46,47.წინა კვლევებმა აჩვენა, რომ ეთილენის თიოურას წარმოქმნაზე გავლენას ახდენს ისეთი ფაქტორები, როგორიცაა მომატებული ტემპერატურა48, ტენიანობის დონე49 და პროდუქტის შენახვის ხანგრძლივობა50.ბიოციდების შენახვის სათანადო პირობებმა შეიძლება შეამსუბუქოს ეს გვერდითი მოვლენები.გარდა ამისა, ევროპის სურსათის უვნებლობის ორგანომ გამოთქვა შეშფოთება პირითიოპიდის ტოქსიკურობის შესახებ, რომელიც დადასტურდა, რომ კანცეროგენულია სხვა ცხოველების საჭმლის მომნელებელი სისტემებისთვის51.
მანკოზების, პირითიოსტრობინის და ტრიფლოქსისტრობინის პერორალური მიღება ზრდის სიმინდის ხვრელის ლარვების სიკვდილიანობას.ამის საპირისპიროდ, მიკლობუტანილი, ციპროციკლინი და კაპტანი არ მოქმედებდნენ სიკვდილიანობაზე.ეს შედეგები განსხვავდება Ladurner et al.52-ის შედეგებისგან, რომლებმაც აჩვენეს, რომ კაპტანმა მნიშვნელოვნად შეამცირა ზრდასრული O. lignaria და Apis mellifera L. (Hymenoptera, Apisidae) გადარჩენა.გარდა ამისა, აღმოჩნდა, რომ ფუნგიციდები, როგორიცაა კაპტანი და ბოსკალიდი, იწვევენ ლარვების სიკვდილიანობას52,53,54 ან ცვლის კვების ქცევას55.ამ ცვლილებებმა, თავის მხრივ, შეიძლება გავლენა მოახდინოს მტვრის კვების ხარისხზე და, საბოლოოდ, ლარვის სტადიის ენერგიის მოპოვებაზე.საკონტროლო ჯგუფში დაფიქსირებული სიკვდილიანობა შეესაბამებოდა სხვა კვლევებს 56,57.
ჩვენს ნაშრომში დაფიქსირებული მამრობითი სქესის თანაფარდობა შეიძლება აიხსნას ისეთი ფაქტორებით, როგორიცაა არასაკმარისი შეჯვარება და ცუდი ამინდის პირობები ყვავილობის დროს, როგორც ადრე შემოთავაზებული იყო O. cornuta-სთვის Vicens-ისა და Bosch-ის მიერ.მიუხედავად იმისა, რომ ჩვენს კვლევაში მდედრებსა და მამრებს ოთხი დღე ჰქონდათ შესაწყვილებლად (პერიოდი, როგორც წესი, საკმარისად ითვლება წარმატებული შეჯვარებისთვის), ჩვენ განზრახ შევამცირეთ სინათლის ინტენსივობა სტრესის შესამცირებლად.თუმცა, ამ მოდიფიკაციამ შეიძლება უნებლიეთ ხელი შეუშალოს შეჯვარების პროცესს61.გარდა ამისა, ფუტკრები განიცდიან არასასურველ ამინდს რამდენიმე დღის განმავლობაში, წვიმისა და დაბალი ტემპერატურის ჩათვლით (<5°C), რაც ასევე შეიძლება უარყოფითად იმოქმედოს შეჯვარების წარმატებაზე4,23.
მიუხედავად იმისა, რომ ჩვენი კვლევა ფოკუსირებული იყო ლარვის მთლიან მიკრობიომზე, ჩვენი შედეგები იძლევა ხედვას ბაქტერიულ თემებს შორის პოტენციურ ურთიერთობებზე, რაც შეიძლება გადამწყვეტი იყოს ფუტკრის კვებისა და ფუნგიციდების ზემოქმედებისთვის.მაგალითად, ლარვებს, რომლებიც იკვებებოდნენ მანკოზებით დამუშავებული მტვრით, მნიშვნელოვნად შემცირდა მიკრობული საზოგადოების სტრუქტურა და სიმრავლე იმ ლარვებთან შედარებით, რომლებიც იკვებებოდნენ დაუმუშავებელი მტვრისგან.ლარვებში, რომლებიც მოიხმარენ დაუმუშავებელ მტვერს, ბაქტერიული ჯგუფები Proteobacteria და Actinobacteria დომინანტური იყო და იყო უპირატესად აერობული ან ფაკულტატურად აერობული.ცნობილია, რომ დელფტის ბაქტერიები, რომლებიც ჩვეულებრივ ასოცირდება ფუტკრის ცალკეულ სახეობებთან, აქვთ ანტიბიოტიკური აქტივობა, რაც მიუთითებს პოტენციურ დამცავ როლზე პათოგენებისგან.სხვა ბაქტერიული სახეობა, Pseudomonas, უხვად იყო ლარვებში, რომლებიც იკვებებოდნენ დაუმუშავებელი მტვრისგან, მაგრამ მნიშვნელოვნად შემცირდა მანკოზებით დამუშავებულ ლარვებში.ჩვენი შედეგები მხარს უჭერს წინა კვლევებს, რომლებიც იდენტიფიცირებდნენ Pseudomonas-ს, როგორც ერთ-ერთ ყველაზე უხვი გვარს O. bicornis35-ში და სხვა მარტოხელა ვოსფებში34.მიუხედავად იმისა, რომ ექსპერიმენტული მტკიცებულებები Pseudomonas-ის როლის შესახებ O. cornifrons-ის ჯანმრთელობაში არ არის შესწავლილი, ეს ბაქტერია ხელს უწყობს დამცავი ტოქსინების სინთეზს ხოჭოში Paederus fuscipes და ხელს უწყობს არგინინის მეტაბოლიზმს in vitro 35, 65. ეს დაკვირვებები ვარაუდობს. პოტენციური როლი ვირუსებისა და ბაქტერიების დაცვაში O. cornifrons larvae-ის განვითარების პერიოდში.Microbacterium არის კიდევ ერთი გვარი, რომელიც იდენტიფიცირებულია ჩვენს კვლევაში, რომელიც ცნობილია, რომ დიდი რაოდენობით არის წარმოდგენილი შავი ჯარისკაცის ბუზის ლარვებში შიმშილის პირობებში66.O. cornifrons ლარვებში მიკრობაქტერიებმა შეიძლება ხელი შეუწყონ ნაწლავის მიკრობიომის წონასწორობასა და გამძლეობას სტრესის პირობებში.გარდა ამისა, Rhodococcus გვხვდება O. cornifrons larvae-ში და ცნობილია თავისი დეტოქსიკაციის უნარით67.ეს გვარი ასევე გვხვდება A. florea-ს ნაწლავებში, მაგრამ ძალიან მცირე რაოდენობით68.ჩვენი შედეგები აჩვენებს მრავალჯერადი გენეტიკური ვარიაციების არსებობას მრავალრიცხოვან მიკრობულ ტაქსებში, რომლებსაც შეუძლიათ შეცვალონ მეტაბოლური პროცესები ლარვებში.თუმცა, საჭიროა O. cornifrons-ის ფუნქციური მრავალფეროვნების უკეთ გაგება.
შეჯამებით, შედეგები მიუთითებს, რომ მანკოზები, პირითიოსტრობინი და ტრიფლოქსისტრობინი ამცირებენ სხეულის წონის მატებას და ზრდის სიმინდის ლარვების სიკვდილიანობას.მიუხედავად იმისა, რომ არსებობს მზარდი შეშფოთება დამბინძურებლებზე ფუნგიციდების ზემოქმედების შესახებ, საჭიროა უკეთ გავიგოთ ამ ნაერთების ნარჩენი მეტაბოლიტების ეფექტი.ეს შედეგები შეიძლება ჩართული იყოს დამბინძურებლების მართვის ინტეგრირებული პროგრამების რეკომენდაციებში, რომლებიც ფერმერებს ეხმარება აირიდონ გარკვეული ფუნგიციდების გამოყენება ხეხილის ყვავილობამდე და მის დროს ფუნგიციდების შერჩევით და გამოყენების ვადის შეცვლით, ან ნაკლებად მავნე ალტერნატივების გამოყენების წახალისებით 36. ეს ინფორმაცია მნიშვნელოვანია რეკომენდაციების შემუშავებისთვის.პესტიციდების გამოყენებაზე, როგორიცაა არსებული შესხურების პროგრამების რეგულირება და შესხურების დროის შეცვლა ფუნგიციდების შერჩევისას ან ნაკლებად საშიში ალტერნატივების გამოყენების ხელშეწყობისას.საჭიროა შემდგომი გამოკვლევა ფუნგიციდების არასასურველი ეფექტების შესახებ სქესთა თანაფარდობაზე, კვების ქცევაზე, ნაწლავის მიკრობიომზე და სიმინდის ნამცხვრის წონის დაკლებასა და სიკვდილიანობაზე საფუძვლად მოლეკულურ მექანიზმებზე.
წყაროს მონაცემები 1, 2 და 3 სურათებში 1 და 2 დეპონირებულია figshare მონაცემთა საცავში DOI: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 და https://doi.org/10.6084/m9.ლეღვი.24996233.მიმდინარე კვლევაში გაანალიზებული თანმიმდევრობები (ნახ. 4, 5) ხელმისაწვდომია NCBI SRA საცავში დაშვების ნომრით PRJNA1023565.
Bosch, J. and Kemp, WP ფუტკრის სახეობების განვითარება და დამკვიდრება, როგორც სასოფლო-სამეურნეო კულტურების დამბინძურებლები: Osmia გვარის მაგალითი.(Hymenoptera: Megachilidae) და ხეხილი.ხარი.არა.რესურსი.92, 3–16 (2002).
პარკერი, MG და სხვ.დამტვერვის პრაქტიკა და ალტერნატიული დამბინძურებლების აღქმა ვაშლის მწარმოებლებს შორის ნიუ-იორკსა და პენსილვანიაში.განახლება.სოფლის მეურნეობა.კვების სისტემები.35, 1–14 (2020).
Koch I., Lonsdorf EW, Artz DR, Pitts-Singer TL და Ricketts TH ნუშის დამტვერვის ეკოლოგია და ეკონომიკა მშობლიური ფუტკრების გამოყენებით.ჯ.ეკონომიკა.არა.111, 16–25 (2018).
ლი, ე., ჰე, ი. და პარკი, ი.-ლ.კლიმატის ცვლილების ზემოქმედება ტრაგოპანის ფენოლოგიაზე: გავლენა მოსახლეობის მართვაზე.Ასვლა.ცვლილება 150, 305–317 (2018).
Artz, DR და Pitts-Singer, TL ფუნგიციდისა და დამხმარე სპრეის ეფექტი ორი მართული მარტოსული ფუტკრის ბუდეს ქცევაზე (Osmia lignaria და Megachile rotundata).PloS One 10, e0135688 (2015).
Beauvais, S. და სხვ.დაბალტოქსიკური მოსავლის ფუნგიციდი (ფენბუკონაზოლი) ხელს უშლის მამრობითი რეპროდუქციული ხარისხის სიგნალებს, რაც იწვევს ველურ მარტოხელა ფუტკრების შეჯვარების წარმატებას.J. აპლიკაციები.ეკოლოგია.59, 1596–1607 (2022).
Sgolastra F. და სხვ.ნეონიკოტინოიდული ინსექტიციდები და ერგოსტეროლის ბიოსინთეზი თრგუნავს სინერგიულ ფუნგიციდების სიკვდილიანობას ფუტკრის სამ სახეობაში.Პესტ კონტროლი.მეცნიერება.73, 1236–1243 (2017).
Kuhneman JG, Gillung J, Van Dyck MT, Fordyce RF.და Danforth BN მარტოხელა ვოსფის ლარვები ცვლის ბაქტერიების მრავალფეროვნებას, რომელსაც მტვერი აწვდის ღეროს ბუდეს ფუტკრებს Osmia cornifrons (Megachilidae).წინა.მიკროორგანიზმი.13, 1057626 (2023).
Dharampal PS, Danforth BN და Steffan SA ფერმენტირებული მტვრის ექტოსიმბიოზური მიკროორგანიზმები ისეთივე მნიშვნელოვანია მარტოხელა ფუტკრების განვითარებისთვის, როგორც თავად მტვერი.ეკოლოგია.ევოლუცია.12. e8788 (2022).
Kelderer M, Manici LM, Caputo F და Thalheimer M. ვაშლის ბაღებში ვაშლის ბაღებში დარგვა ხელახალი დათესვის მიზნით: პრაქტიკული ეფექტურობის კვლევა მიკრობული ინდიკატორების საფუძველზე.მცენარეთა ნიადაგი 357, 381–393 (2012).
Martin PL, Kravchik T., Khodadadi F., Achimovich SG და Peter KA ვაშლის მწარე ლპობა შუა ატლანტიკური შეერთებულ შტატებში: გამომწვევი სახეობების შეფასება და რეგიონალური ამინდის პირობებისა და ჯიშის მგრძნობელობის გავლენა.Phytopathology 111, 966–981 (2021).
Cullen MG, Thompson LJ, Carolan JK, Stout JK.და Stanley DA ფუნგიციდები, ჰერბიციდები და ფუტკარი: არსებული კვლევებისა და მეთოდების სისტემატური მიმოხილვა.PLoS One 14, e0225743 (2019).
Pilling, ED და Jepson, PC EBI ფუნგიციდების და პირეტროიდული ინსექტიციდების სინერგიული ეფექტები თაფლის ფუტკრებზე (Apis mellifera).მავნებელია მეცნიერება.39, 293–297 (1993).
Mussen, EC, Lopez, JE და Peng, CY შერჩეული ფუნგიციდების ეფექტი თაფლის ფუტკრის ლარვების ზრდასა და განვითარებაზე Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae).ოთხშაბათი.არა.33, 1151-1154 (2004).
Van Dyke, M., Mullen, E., Wickstead, D., and McArt, S. გადაწყვეტილების სახელმძღვანელო პესტიციდების გამოყენებისთვის ხეების ბაღებში დამბინძურებლების დასაცავად (კორნელის უნივერსიტეტი, 2018).
Iwasaki, JM and Hogendoorn, K. ფუტკრების ექსპოზიცია არაპესტიციდებზე: მეთოდების მიმოხილვა და მოხსენებული შედეგები.სოფლის მეურნეობა.ეკოსისტემა.ოთხშაბათი.314, 107423 (2021).
Kopit AM, Klinger E, Cox-Foster DL, Ramirez RA.და Pitts-Singer TL მიწოდების ტიპისა და პესტიციდების ზემოქმედების ეფექტი Osmia lignaria-ს ლარვის განვითარებაზე (Hymenoptera: Megachilidae).ოთხშაბათი.არა.51, 240–251 (2022).
Kopit AM და Pitts-Singer TL პესტიციდების ზემოქმედების გზები მარტოხელა ცარიელ ბუდე ფუტკრებზე.ოთხშაბათი.არა.47, 499–510 (2018).
პან, NT და სხვ.ბიოშეფასების ახალი პროტოკოლი პესტიციდების ტოქსიკურობის შესაფასებლად ზრდასრულ იაპონურ ბაღის ფუტკრებში (Osmia cornifrons).მეცნიერება.მოხსენებები 10, 9517 (2020).