ფუნგიციდების დამატება ამცირებს ენერგიის წმინდა მომატებას და მიკრობიომის მრავალფეროვნებას მარტოხელა ქვისმცველ ფუტკრებში.

გმადლობთ, რომ ეწვიეთ Nature.com-ს. თქვენს მიერ გამოყენებული ბრაუზერის ვერსიას CSS-ის შეზღუდული მხარდაჭერა აქვს. საუკეთესო შედეგის მისაღწევად, გირჩევთ, გამოიყენოთ თქვენი ბრაუზერის უფრო ახალი ვერსია (ან გამორთოთ თავსებადობის რეჟიმი Internet Explorer-ში). ამასობაში, მუდმივი მხარდაჭერის უზრუნველსაყოფად, საიტს სტილის ან JavaScript-ის გარეშე ვაჩვენებთ.
ფუნგიციდები ხშირად გამოიყენება ხის ნაყოფის ყვავილობის დროს და შეიძლება საფრთხე შეუქმნას მწერების დამტვერვას. თუმცა, ცოტა რამ არის ცნობილი იმის შესახებ, თუ როგორ რეაგირებენ არაფუტკრისებრი დამტვერავი მწერები (მაგ., მარტოხელა ფუტკრები, Osmia cornifrons) ყვავილობის პერიოდში ვაშლებზე ხშირად გამოყენებულ კონტაქტურ და სისტემურ ფუნგიციდებზე. ცოდნის ეს ხარვეზი ზღუდავს მარეგულირებელ გადაწყვეტილებებს ფუნგიციდის შესხურების უსაფრთხო კონცენტრაციებისა და დროის განსაზღვრის შესახებ. ჩვენ შევაფასეთ ორი კონტაქტური ფუნგიციდის (კაპტანი და მანკოზები) და ოთხი შრეთაშორისი/ფიტოსისტემის ფუნგიციდის (ციპროციკლინი, მიკლობუტანილი, პიროსტრობინი და ტრიფლოქსისტრობინი) ეფექტები. გავლენა ლარვების წონის მატებაზე, გადარჩენაზე, სქესთა თანაფარდობასა და ბაქტერიულ მრავალფეროვნებაზე. შეფასება ჩატარდა ქრონიკული ორალური ბიოანალიზის გამოყენებით, რომლის დროსაც მტვერი დამუშავდა სამ დოზით, რომელიც დაფუძნებული იყო მინდორში გამოყენებისთვის ამჟამად რეკომენდებული დოზაზე (1X), ნახევარ დოზაზე (0.5X) და დაბალ დოზაზე (0.1X). ​​მანკოზების და პირიტიზოლინის ყველა დოზამ მნიშვნელოვნად შეამცირა სხეულის წონა და ლარვების გადარჩენა. შემდეგ ჩვენ გამოვყავით 16S გენი მანკოზების ლარვის ბაქტერიომის დასახასიათებლად, ფუნგიციდი, რომელიც პასუხისმგებელია ყველაზე მაღალ სიკვდილიანობაზე. ჩვენ აღმოვაჩინეთ, რომ ბაქტერიული მრავალფეროვნება და სიმრავლე მნიშვნელოვნად შემცირდა მანკოზებით დამუშავებული მტვრის საკვებით გამოკვებილ ლარვებში. ჩვენი ლაბორატორიული შედეგები მიუთითებს, რომ ამ ფუნგიციდების ზოგიერთი სახეობის შესხურება ყვავილობის პერიოდში განსაკუთრებით საზიანოა O. cornifrons-ის ჯანმრთელობისთვის. ეს ინფორმაცია მნიშვნელოვანია ხეხილის დაცვის პროდუქტების მდგრადი გამოყენების შესახებ სამომავლო მართვის გადაწყვეტილებებისთვის და წარმოადგენს დამამტვერიანებლების დაცვისკენ მიმართული მარეგულირებელი პროცესების საფუძველს.
მარტოხელა ქვის ფუტკარი Osmia cornifrons (Hymenoptera: Megachilidae) შეერთებულ შტატებში იაპონიიდან 1970-იანი წლების ბოლოს და 1980-იანი წლების დასაწყისში შემოიყვანეს და მას შემდეგ ეს სახეობა მნიშვნელოვან დამამტვერიანებლის როლს ასრულებს მართულ ეკოსისტემებში. ამ ფუტკრის ნატურალიზებული პოპულაციები ველური ფუტკრების დაახლოებით 50 სახეობის ნაწილია, რომლებიც ავსებენ ფუტკრებს, რომლებიც შეერთებულ შტატებში ნუშისა და ვაშლის ბაღებს ამტვერიანებენ2,3. ქვის ფუტკრები მრავალი გამოწვევის წინაშე დგანან, მათ შორის ჰაბიტატის ფრაგმენტაცია, პათოგენები და პესტიციდები3,4. ინსექტიციდებს შორის ფუნგიციდები ამცირებენ ენერგიის მომატებას, საკვების მოპოვებას5 და სხეულის კონდიცირებას6,7. მიუხედავად იმისა, რომ ბოლოდროინდელი კვლევები ვარაუდობენ, რომ ქვის ფუტკრების ჯანმრთელობაზე პირდაპირ გავლენას ახდენს კომენსალური და ექტობაქტიკური მიკროორგანიზმები8,9, რადგან ბაქტერიებსა და სოკოებს შეუძლიათ გავლენა მოახდინონ კვებასა და იმუნურ რეაქციებზე, ფუნგიციდების ზემოქმედების გავლენა ქვის ფუტკრების მიკრობულ მრავალფეროვნებაზე ახლა იწყება შესწავლა.
სხვადასხვა მოქმედების (კონტაქტური და სისტემური) ფუნგიციდებით ხილის ბაღებში ყვავილობამდე და ყვავილობის პერიოდში ატარებენ შესხურებას ისეთი დაავადებების სამკურნალოდ, როგორიცაა ვაშლის ქერქის ქერქის, მწარე ლპობის, ყავისფერი ლპობის და ჭრაქისებრი ნაცრის10,11. ფუნგიციდები უვნებლად ითვლება დამამტვერიანებლებისთვის, ამიტომ ისინი რეკომენდებულია მებაღეებისთვის ყვავილობის პერიოდში; ფუტკრების მიერ ამ ფუნგიციდების ზემოქმედებისა და მიღების წესი შედარებით კარგად არის ცნობილი, რადგან ეს აშშ-ის გარემოს დაცვის სააგენტოს და მრავალი სხვა ეროვნული მარეგულირებელი სააგენტოს მიერ პესტიციდების რეგისტრაციის პროცესის ნაწილია12,13,14. თუმცა, ფუნგიციდების გავლენა არაფუტკრებზე ნაკლებად არის ცნობილი, რადგან ისინი არ არის მოთხოვნილი შეერთებულ შტატებში მარკეტინგული ავტორიზაციის შეთანხმებებით15. გარდა ამისა, ზოგადად არ არსებობს სტანდარტიზებული პროტოკოლები ცალკეული ფუტკრების ტესტირებისთვის16,17 და რთულია ისეთი კოლონიების შენარჩუნება, რომლებიც ფუტკრებს ტესტირებისთვის აწვდიან.18. ევროპასა და აშშ-ში სულ უფრო ხშირად ტარდება სხვადასხვა მართული ფუტკრების კვლევები ველურ ფუტკრებზე პესტიციდების ზემოქმედების შესასწავლად და ახლახან შემუშავდა სტანდარტიზებული პროტოკოლები O. cornifrons-ისთვის19.
რქიანი ფუტკრები მონოციტებია და კომერციულად გამოიყენება კობრის კულტურებში, როგორც თაფლის ფუტკრების დამატება ან შემცვლელი. ეს ფუტკრები მარტიდან აპრილამდე ჩნდებიან, ხოლო ნაადრევად მომწიფებული მამრები მდედრებზე სამი-ოთხი დღით ადრე ჩნდებიან. შეჯვარების შემდეგ, მდედრი აქტიურად აგროვებს მტვერს და ნექტარს, რათა უზრუნველყოს ნაყოფის უჯრედების სერია მილისებურ ბუდის ღრუში (ბუნებრივი ან ხელოვნური)1,20. კვერცხებს დებენ უჯრედების შიგნით არსებულ მტვერზე; შემდეგ მდედრი აშენებს თიხის კედელს შემდეგი უჯრედის მომზადებამდე. პირველი სტადიის ლარვები ქორიონშია ჩასმული და ემბრიონული სითხით იკვებებიან. მეორედან მეხუთე სტადიამდე (პრეპუპა), ლარვები მტვერით იკვებებიან22. მას შემდეგ, რაც მტვრის მარაგი მთლიანად ამოიწურება, ლარვები ქმნიან ჭუპრებს, ჭუპრდებიან და ზრდასრულ ინდივიდებად გამოდიან იმავე ნაყოფის კამერაში, ჩვეულებრივ, ზაფხულის ბოლოს20,23. ზრდასრული ინდივიდებიდან მომდევნო გაზაფხულზე ჩნდებიან. ზრდასრული ინდივიდებისგან გადარჩენა დაკავშირებულია წმინდა ენერგიის მატებასთან (წონის მატებასთან) საკვების მიღების მიხედვით. ამრიგად, მტვრის კვებითი ღირებულება, ისევე როგორც სხვა ფაქტორები, როგორიცაა ამინდი ან პესტიციდების ზემოქმედება, გადარჩენისა და ჯანმრთელობის განმსაზღვრელი ფაქტორებია24.
ყვავილობამდე გამოყენებული ინსექტიციდები და ფუნგიციდები მცენარის სისხლძარღვებში სხვადასხვა ხარისხით მოძრაობენ, ტრანსლამინარულიდან (მაგ., ზოგიერთი ფუნგიციდის მსგავსად, ფოთლების ზედა ზედაპირიდან ქვედა ზედაპირზე გადაადგილების უნარი)25 ჭეშმარიტად სისტემურ ეფექტებამდე. , რომლებსაც შეუძლიათ ფესვებიდან გვირგვინში შეღწევა, შეუძლიათ ვაშლის ყვავილების ნექტარში მოხვედრა26, სადაც მათ შეუძლიათ ზრდასრული O. cornifrons-ის მოკვლა27. ზოგიერთი პესტიციდი ასევე ხვდება მტვერში, რაც გავლენას ახდენს სიმინდის ლარვების განვითარებაზე და იწვევს მათ სიკვდილს19. სხვა კვლევებმა აჩვენა, რომ ზოგიერთ ფუნგიციდს შეუძლია მნიშვნელოვნად შეცვალოს მონათესავე სახეობის O. lignaria-ს ბუდობის ქცევა28. გარდა ამისა, პესტიციდების ზემოქმედების სცენარების სიმულირების ლაბორატორიულმა და საველე კვლევებმა (მათ შორის ფუნგიციდები) აჩვენა, რომ პესტიციდები უარყოფითად მოქმედებს თაფლის ფუტკრებისა და ზოგიერთი მარტოხელა ფუტკრის ფიზიოლოგიაზე22, მორფოლოგიასა29 და გადარჩენაზე. ყვავილობის დროს პირდაპირ ღია ყვავილებზე გამოყენებული სხვადასხვა ფუნგიციდური შესხურებამ შეიძლება დააბინძუროს ზრდასრული ფუტკრების მიერ ლარვების განვითარებისთვის შეგროვებული მტვერი, რომელთა ეფექტები ჯერ კიდევ შესასწავლია30.
სულ უფრო მეტად აღიარებულია, რომ ლარვების განვითარებაზე გავლენას ახდენს მტვერი და საჭმლის მომნელებელი სისტემის მიკრობული საზოგადოებები. თაფლის ფუტკრის მიკრობიომი გავლენას ახდენს ისეთ პარამეტრებზე, როგორიცაა სხეულის მასა31, მეტაბოლური ცვლილებები22 და პათოგენების მიმართ მგრძნობელობა32. წინა კვლევებში შესწავლილია განვითარების სტადიის, საკვები ნივთიერებების და გარემოს გავლენა მარტოხელა ფუტკრების მიკრობიომაზე. ამ კვლევებმა გამოავლინა მსგავსება ლარვებისა და მტვრის მიკრობიომების სტრუქტურასა და სიმრავლეში33, ასევე ყველაზე გავრცელებული ბაქტერიული გვარები Pseudomonas და Delftia, მარტოხელა ფუტკრების სახეობებს შორის. თუმცა, მიუხედავად იმისა, რომ ფუნგიციდები დაკავშირებულია ფუტკრის ჯანმრთელობის დაცვის სტრატეგიებთან, ფუნგიციდების გავლენა ლარვების მიკრობიოტაზე პირდაპირი პერორალური ზემოქმედებით ჯერ კიდევ შეუსწავლელია.
ამ კვლევაში შემოწმდა აშშ-ში ხის ნაყოფზე გამოსაყენებლად რეგისტრირებული ექვსი ფართოდ გამოყენებული ფუნგიციდის რეალურ დოზებზე ზემოქმედება, მათ შორის კონტაქტური და სისტემური ფუნგიციდები, რომლებიც პერორალურად ენიშნებოდათ სიმინდის რქისებრი ჩრჩილის ლარვებს დაბინძურებული საკვებიდან. ჩვენ აღმოვაჩინეთ, რომ კონტაქტური და სისტემური ფუნგიციდები ამცირებდნენ ფუტკრის სხეულის წონის მატებას და ზრდიდნენ სიკვდილიანობას, ყველაზე მძიმე ეფექტები კი მანკოზებსა და პირითიოპიდს უკავშირდება. შემდეგ ჩვენ შევადარეთ მანკოზებით დამუშავებული მტვრის დიეტით გამოკვებილი ლარვების მიკრობული მრავალფეროვნება საკონტროლო დიეტით გამოკვებილ ლარვებს. ჩვენ განვიხილავთ სიკვდილიანობის საფუძვლად მყოფ პოტენციურ მექანიზმებს და მავნებლებისა და დამამტვერიანებლების ინტეგრირებული მართვის (IPPM)36 პროგრამების შედეგებს.
ზრდასრული O. cornifrons-ის ჭუპრები, რომლებიც ჭუპრებში იზამთრებენ, მიღებული იქნა ხილის კვლევის ცენტრიდან, ბიგლერვილი, პენსილვანია, და შენახული იქნა -3-დან 2°C-მდე (±0.3°C) ტემპერატურაზე. ექსპერიმენტამდე (სულ 600 ჭუპრი). 2022 წლის მაისში, ყოველდღიურად 100 O. cornifrons-ის ჭუპრი გადაიტანებოდა პლასტმასის ჭიქებში (50 ჭუპრი თითო ჭიქაზე, DI 5 სმ × 15 სმ სიგრძის) და ჭიქებში მოათავსეს ხელსახოცები გახსნის გასაადვილებლად და საღეჭი სუბსტრატის შესაქმნელად, რაც შეამცირებდა სტრესს ქვაფენილ ფუტკრებზე37. ჭუპრებით სავსე ორი პლასტმასის ჭიქა მოათავსეთ მწერების გალიაში (30 × 30 × 30 სმ, BugDorm MegaView Science Co. Ltd., ტაივანი) 10 მლ საკვებურებთან ერთად, რომლებიც შეიცავენ 50%-იან საქაროზას ხსნარს და შეინახეთ ოთხი დღის განმავლობაში დახურვისა და შეჯვარების უზრუნველსაყოფად. ტემპერატურა: 23°C, ფარდობითი ტენიანობა: 60%, ფოტოპერიოდული: 10 ლ (დაბალი ინტენსივობა): 14 დღე. 100 შეწყვილებული დედალი და მამრი ექვსი დღის განმავლობაში (დღეში 100) ყოველ დილით უშვებდნენ ორ ხელოვნურ ბუდეში ვაშლის პიკური ყვავილობის დროს (ხაფანგ-ბუდე: სიგანე 33.66 × სიმაღლე 30.48 × სიგრძე 46.99 სმ; დამატებითი სურათი 1). ისინი განთავსებული იყო პენსილვანიის შტატის არბორეტუმში, ალუბლის (Prunus cerasus 'Eubank' Sweet Cherry Pie™), ატმის (Prunus persica 'Contender'), Prunus persica 'PF 27A' Flamin Fury®), მსხლის (Pyrus perifolia 'Olympic', Pyrus perifolia 'Shinko', Pyrus perifolia 'Shinseiki'), კორონარიას ვაშლის ხის (Malus coronaria) და ვაშლის ხეების მრავალი სახეობის (Malus coronaria, Malus), შინაური ვაშლის ხის 'Co-op 30′ Enterprise™, Malus ვაშლის ხის 'Co-Op 31′ Winecrisp™, ბეგონიის 'Freedom', ბეგონიის 'Golden Delicious', ბეგონიის 'Nova Spy') მახლობლად. თითოეული ლურჯი პლასტმასის ჩიტების სახლი ორ ხის ყუთზე ეტევა. თითოეული ბუდის ყუთი შეიცავდა 800 ცარიელ კრაფტ ქაღალდის მილს (სპირალური ფორმის, 0.8 სმ შიდა დიამეტრის × 15 სმ სიგრძის) (Jonesville Paper Tube Co., მიჩიგანი), რომლებიც ჩასმული იყო გაუმჭვირვალე ცელოფანის მილებში (0.7 OD იხ. პლასტმასის საცობები (T-1X საცობები) ბუდის ადგილს უზრუნველყოფენ.
ორივე ბუდის ყუთი აღმოსავლეთისკენ იყო მიმართული და დაფარული იყო მწვანე პლასტმასის ბაღის ღობით (Everbilt მოდელი #889250EB12, ღიობის ზომა 5 × 5 სმ, 0.95 მ × 100 მ), რათა თავიდან აეცილებინათ მღრღნელებისა და ფრინველების წვდომა და მოთავსებული იყო ნიადაგის ზედაპირზე ბუდის ყუთის ნიადაგის ყუთების გვერდით. ბუდის ყუთი (დამატებითი სურათი 1ა). სიმინდის ჭაღარას კვერცხები ყოველდღიურად გროვდებოდა ბუდებიდან 30 მილი შეგროვებით და ლაბორატორიაში გადატანით. მაკრატლის გამოყენებით, მილის ბოლოში გააკეთეთ ჭრილი, შემდეგ დაშალეთ სპირალური მილი, რათა გამოჩენილიყო ნაყოფის უჯრედები. ცალკეული კვერცხები და მათი მტვერი ამოიღეს მოხრილი სპატულით (Microslide tool kit, BioQuip Products Inc., კალიფორნია). კვერცხები ინკუბირებული იყო ნესტიან ფილტრის ქაღალდზე და მოთავსებული იყო პეტრის ჭურჭელში 2 საათის განმავლობაში, სანამ ჩვენს ექსპერიმენტებში გამოიყენებოდა (დამატებითი სურათი 1ბ-დ).
ლაბორატორიაში შევაფასეთ ვაშლის ყვავილობამდე და მის დროს გამოყენებული ექვსი ფუნგიციდის ორალური ტოქსიკურობა სამ კონცენტრაციაზე (0.1X, 0.5X და 1X, სადაც 1X არის 100 გალონ წყალზე/აკრზე გამოყენებული ნიშნული. მაღალი საველე დოზა = კონცენტრაცია საველე პირობებში). , ცხრილი 1). თითოეული კონცენტრაცია განმეორდა 16-ჯერ (n = 16). ორი კონტაქტური ფუნგიციდი (ცხრილი S1: მანკოზები 2696.14 ppm და კაპტანი 2875.88 ppm) და ოთხი სისტემური ფუნგიციდი (ცხრილი S1: პირითიოსტრობინი 250.14 ppm; ტრიფლოქსისტრობინი 110.06 ppm; მიკლობუტანილ აზოლი 75 0.12 ppm; ციპროდინილი 280.845 ppm) ტოქსიკურობა ხილის, ბოსტნეულის და დეკორატიული კულტურებისთვის. მტვერი საფქვავის გამოყენებით ჰომოგენიზებული იქნა, 0.20 გ გადაიტანეს ჭაში (24-ჭედიანი Falcon Plate) და დავამატეთ და შევურიეთ 1 μL ფუნგიციდის ხსნარი პირამიდული მტვრის წარმოსაქმნელად 1 მმ სიღრმის ჭებში, რომლებშიც კვერცხები მოათავსეს. მოათავსეთ მინი სპატულით (დამატებითი სურათი 1c,d). Falcon-ის ფირფიტები ინახებოდა ოთახის ტემპერატურაზე (25°C) და 70%-იან ფარდობით ტენიანობაზე. ჩვენ შევადარეთ ისინი საკონტროლო ლარვებს, რომლებიც იკვებებოდნენ სუფთა წყლით დამუშავებული ერთგვაროვანი მტვრის საკვებით. ჩვენ აღვრიცხეთ სიკვდილიანობა და გავზომეთ ლარვების წონა ყოველ მეორე დღეს, სანამ ლარვები არ მიაღწევდნენ პრეპუპალურ ასაკს ანალიტიკური სასწორის გამოყენებით (Fisher Scientific, სიზუსტე = 0.0001 გ). და ბოლოს, სქესობრივი თანაფარდობა შეფასდა ჭუპრის გახსნით 2.5 თვის შემდეგ.
დნმ ამოღებული იქნა მთლიანი O. cornifrons-ის ლარვებიდან (n = 3 დამუშავების პირობის მიხედვით, მანკოზებით დამუშავებული და დაუმუშავებელი მტვერი) და ჩვენ ჩავატარეთ ამ ნიმუშებზე მიკრობული მრავალფეროვნების ანალიზი, განსაკუთრებით იმიტომ, რომ მანკოზებში ყველაზე მაღალი სიკვდილიანობა დაფიქსირდა MnZn-ის მიმღებ ლარვებში. დნმ ამპლიფიცირებული იქნა, გაიწმინდა DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead დნმ ნაკრების (Zymo Research, ირვინი, კალიფორნია) გამოყენებით და სეკვენირებული იქნა (600 ციკლი) Illumina® MiSeq™-ზე v3 ნაკრების გამოყენებით. ბაქტერიული 16S რიბოსომული რნმ გენების მიზნობრივი სეკვენირება ჩატარდა Quick-16S™ NGS Library Prep Kit-ის (Zymo Research, ირვინი, კალიფორნია) გამოყენებით, 16S rRNA გენის V3-V4 რეგიონზე მიმართული პრაიმერების გამოყენებით. გარდა ამისა, 18S სეკვენირება ჩატარდა 10%-იანი PhiX ჩართვის გამოყენებით, ხოლო ამპლიფიკაცია ჩატარდა პრაიმერების წყვილის 18S001 და NS4 გამოყენებით.
დაწყვილებული წაკითხვების იმპორტი და დამუშავება39 QIIME2 მილსადენის (v2022.11.1) გამოყენებით. ეს წაკითხვები მოიჭრა და გაერთიანდა, ხოლო ქიმერული თანმიმდევრობები ამოღებული იქნა QIIME2-ში DADA2 დანამატის გამოყენებით (qiime dada2 ხმაურის დაწყვილება)40. 16S და 18S კლასის მინიჭება შესრულდა ობიექტის კლასიფიკატორის დანამატის Classify-sklearn და წინასწარ გაწვრთნილი არტეფაქტის silva-138-99-nb-classifier-ის გამოყენებით.
ყველა ექსპერიმენტული მონაცემი შემოწმდა ნორმალურობაზე (შაპირო-ვილკსი) და ვარიაციების ერთგვაროვნებაზე (ლევენის ტესტი). რადგან მონაცემთა ნაკრები არ აკმაყოფილებდა პარამეტრული ანალიზის დაშვებებს და ტრანსფორმაციამ ვერ შეძლო ნარჩენების სტანდარტიზაცია, ლარვების ახალ წონაზე დამუშავების ეფექტის შესაფასებლად ჩავატარეთ არაპარამეტრული ორმხრივი ANOVA (კრუსკალ-უოლისი) ორი ფაქტორით [დრო (სამფაზიანი 2, 5 და 8 დღიანი დროის წერტილები) და ფუნგიციდი], შემდეგ კი უილკოქსონის ტესტის გამოყენებით ჩატარდა პოსტ-ჰოკ არაპარამეტრული წყვილური შედარებები. ფუნგიციდების სამი კონცენტრაციის გადარჩენაზე ეფექტების შესადარებლად გამოვიყენეთ პუასონის განაწილების მქონე გენერალიზებული წრფივი მოდელი (GLM). დიფერენციალური სიმრავლის ანალიზისთვის, ამპლიკონის თანმიმდევრობის ვარიანტების (ASV) რაოდენობა შეიკუმშა გვარის დონეზე. ჯგუფებს შორის დიფერენციალური სიმრავლის შედარება 16S-ის (გვარის დონე) და 18S ფარდობითი სიმრავლის გამოყენებით ჩატარდა პოზიციის, მასშტაბისა და ფორმის განზოგადებული დანამატის მოდელის (GAMLSS) გამოყენებით ბეტა ნულოვანი გაბერვით (BEZI) ოჯახური განაწილებებით, რომლებიც მოდელირებული იყო მაკროზე. მიკრობიომ R43-ში (v1.1). 1). დიფერენციალური ანალიზის წინ მიტოქონდრიული და ქლოროპლასტური სახეობების ამოღება. 18S-ის სხვადასხვა ტაქსონომიური დონის გამო, დიფერენციალური ანალიზისთვის გამოყენებული იქნა თითოეული ტაქსონის მხოლოდ ყველაზე დაბალი დონე. ყველა სტატისტიკური ანალიზი ჩატარდა R-ის (v. 3.4.3., CRAN პროექტი) გამოყენებით (Team 2013).
მანკოზების, პირითიოსტრობინის და ტრიფლოქსისტრობინის ზემოქმედებამ მნიშვნელოვნად შეამცირა სხეულის წონის მატება O. cornifrons-ში (სურ. 1). ეს ეფექტები მუდმივად დაფიქსირდა სამივე შეფასებული დოზისთვის (სურ. 1ა–გ). ციკლოსტრობინმა და მიკლობუტანილმა მნიშვნელოვნად არ შეამცირეს ლარვების წონა.
ღეროსებრი მწერის ლარვების საშუალო ახალი წონა გაზომილი იქნა სამ დროს ოთხი დიეტური დამუშავების დროს (ერთგვაროვანი მტვრის საკვები + ფუნგიციდი: კონტროლი, 0.1X, 0.5X და 1X დოზები). (ა) დაბალი დოზა (0.1X): პირველი დრო (დღე 1): χ2: 30.99, DF = 6; P < 0.0001, მეორე დრო (დღე 5): 22.83, DF = 0.0009; მესამე დრო; დრო (დღე 8): χ2: 28.39, DF = 6; (ბ) ნახევარი დოზა (0.5X): პირველი დრო (დღე 1): χ2: 35.67, DF = 6; P < 0.0001, მეორე დრო (დღე 1). ): χ2: 15.98, DF = 6; P = 0.0090; მესამე დროის წერტილი (დღე 8) χ2: 16.47, DF = 6; (გ) ადგილი ან სრული დოზა (1X): პირველი დროის წერტილი (დღე 1) χ2: 20.64, P = 6; P = 0.0326, მეორე დროის წერტილი (დღე 5): χ2: 22.83, DF = 6; P = 0.0009; მესამე დროის წერტილი (დღე 8): χ2: 28.39, DF = 6; ვარიაციის არაპარამეტრული ანალიზი. სვეტები წარმოადგენს წყვილური შედარებების საშუალო ± SE-ს (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05, **P ≤ 0.001, ***P ≤ 0.0001.
ყველაზე დაბალი დოზის (0.1X) გამოყენებისას, ტრიფლოქსისტრობინის შემთხვევაში ლარვის სხეულის წონა შემცირდა 60%-ით, მანკოზების შემთხვევაში - 49%-ით, მიკლობუტანილის შემთხვევაში - 48%-ით და პირითისტრობინის შემთხვევაში - 46%-ით (სურ. 1ა). საველე დოზის ნახევრის (0.5X) ზემოქმედებისას, მანკოზების ლარვების სხეულის წონა შემცირდა 86%-ით, პირითიოსტრობინის შემთხვევაში - 52%-ით, ხოლო ტრიფლოქსისტრობინის შემთხვევაში - 50%-ით (სურ. 1ბ). მანკოზების სრული საველე დოზა (1X) ლარვის წონა შემცირდა 82%-ით, პირითიოსტრობინის შემთხვევაში - 70%-ით, ხოლო ტრიფლოქსისტრობინის, მიკლობუტანილის და სანგარდის შემთხვევაში - დაახლოებით 30%-ით (სურ. 1გ).
სიკვდილიანობა ყველაზე მაღალი იყო მანკოზებით დამუშავებული მტვრის მქონე ლარვებში, შემდეგ მოდიოდა პირითიოსტრობინი და ტრიფლოქსისტრობინი. სიკვდილიანობა იზრდებოდა მანკოზების და პირიტიზოლინის დოზების ზრდასთან ერთად (სურ. 2; ცხრილი 2). თუმცა, სიმინდის მღრღნელის სიკვდილიანობა მხოლოდ უმნიშვნელოდ გაიზარდა ტრიფლოქსისტრობინის კონცენტრაციის ზრდასთან ერთად; ციპროდინილმა და კაპტანმა სიკვდილიანობა მნიშვნელოვნად არ გაზარდეს საკონტროლო მკურნალობასთან შედარებით.
ჭაობის ბუზის ლარვების სიკვდილიანობა შედარებული იქნა ექვსი სხვადასხვა ფუნგიციდით ინდივიდუალურად დამუშავებული მტვრის მიღების შემდეგ. მანკოზები და პენტოპირამიდი უფრო მგრძნობიარენი იყვნენ სიმინდის ჭიების პერორალური ზემოქმედების მიმართ (GLM: χ = 29.45, DF = 20, P = 0.0059) (ხაზი, დახრილობა = 0.29, P < 0.001; დახრილობა = 0.24, P <0.00)).
საშუალოდ, ყველა მკურნალობის შედეგად, პაციენტების 39.05% მდედრობითი სქესის იყო, ხოლო 60.95% - მამრობითი სქესის. საკონტროლო ჯგუფში ქალების წილი როგორც დაბალი დოზის (0.1X), ასევე ნახევარი დოზის (0.5X) კვლევებში 40% იყო, ხოლო საველე დოზის (1X) კვლევებში 30%. მანკოზებითა და მიკლობუტანილით დამუშავებულ მტვრით კვებაზე მყოფ ლარვებს შორის 0.1X დოზის მიღებისას, ზრდასრული ლარვების 33.33% მდედრი იყო, ზრდასრული ლარვების 22% მდედრი, ზრდასრული ლარვების 44% მდედრი, ზრდასრული ლარვების 44% მდედრი, ზრდასრული ლარვების 41% მდედრი, ხოლო საკონტროლო ჯგუფი - 31% (სურ. 3ა). დოზის 0.5-ჯერ მეტი დოზის მიღებისას, მანკოზების და პირითიოსტრობინის ჯგუფში ზრდასრული ჭიების 33% მდედრი იყო, ტრიფლოქსისტრობინის ჯგუფში - 36%, მიკლობუტანილის ჯგუფში - 41% და ციპროსტრობინის ჯგუფში - 46%. ეს მაჩვენებელი კაპტანის ჯგუფში 53% და საკონტროლო ჯგუფში 38% იყო (სურ. 3ბ). 1X დოზის მიღებისას, მანკოზების ჯგუფში 30% ქალი იყო, პირითიოსტრობინის ჯგუფში - 36%, ტრიფლოქსისტრობინის ჯგუფში - 44%, მიკლობუტანილის ჯგუფში - 38%, საკონტროლო ჯგუფის 50% - 38.5% (სურ. 3გ).
ლარვის სტადიაზე ფუნგიციდით ზემოქმედების შემდეგ მდედრი და მამრი მღრღნელების პროცენტული მაჩვენებელი. (ა) დაბალი დოზა (0.1X). ​​(ბ) ნახევარი დოზა (0.5X). (გ) საველე დოზა ან სრული დოზა (1X).
16S თანმიმდევრობის ანალიზმა აჩვენა, რომ ბაქტერიული ჯგუფი განსხვავდებოდა მანკოზებით დამუშავებული მტვრის მტვრით გამოკვებილ და დაუმუშავებელი მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მაჩვენებელში (სურ. 4ა). დაუმუშავებელი მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მტვრის მაჩვენებელზე მაღალი იყო (სურ. 4ბ). მიუხედავად იმისა, რომ ჯგუფებს შორის სიმდიდრის დაფიქსირებული სხვაობა სტატისტიკურად მნიშვნელოვანი არ იყო, ის მნიშვნელოვნად დაბალი იყო, ვიდრე დაუმუშავებელი მტვრის ...
16S თანმიმდევრობებზე დაფუძნებული SAV პროფილები შედარებული იყო შენონის სიმდიდრესთან და ფილუმის დონეზე დაკვირვებულ სიმდიდრესთან. (ა) პრინციპული კოორდინატების ანალიზი (PCoA), რომელიც დაფუძნებულია დაუმუშავებელი მტვრით კვებაზე ან საკონტროლო (ლურჯი) და მანკოზებით კვებაზე მყოფ ლარვებში (ნარინჯისფერი). თითოეული მონაცემი წარმოადგენს ცალკეულ ნიმუშს. PCoA გამოითვალა მრავალვარიანტული t განაწილების ბრეი-კურტისის მანძილის გამოყენებით. ოვლები წარმოადგენს 80%-იან სანდოობის დონეს. (ბ) ყუთ-დიაგრამა, შენონის სიმდიდრის ნედლი მონაცემები (წერტილები) და გ. დაკვირვებადი სიმდიდრე. ყუთ-დიაგრამები აჩვენებს ყუთებს მედიანა ხაზისთვის, კვარტილთაშორისი დიაპაზონისთვის (IQR) და 1.5 × IQR (n = 3).
მანკოზებით დამუშავებული და დაუმუშავებელი მტვერით იკვებებიან ლარვების მიკრობული საზოგადოებების შემადგენლობა. (ა) ლარვებში მიკრობული გვარების ფარდობითი სიმრავლე. (ბ) იდენტიფიცირებული მიკრობული საზოგადოებების სითბური რუკა. Delftia (შანსების თანაფარდობა (OR) = 0.67, P = 0.0030) და Pseudomonas (OR = 0.3, P = 0.0074), Microbacterium (OR = 0.75, P = 0.0617) (OR = 1.5, P = 0.0060); სითბური რუკის რიგები დაჯგუფებულია კორელაციის მანძილისა და საშუალო კავშირის გამოყენებით.
ჩვენი შედეგები აჩვენებს, რომ ყვავილობის პერიოდში ფართოდ გამოყენებული კონტაქტური (მანკოზები) და სისტემური (პიროსტრობინი და ტრიფლოქსისტრობინი) ფუნგიციდების პერორალურმა ზემოქმედებამ მნიშვნელოვნად შეამცირა სიმინდის ლარვების წონაში მატება და გაზარდა სიკვდილიანობა. გარდა ამისა, მანკოზებმა მნიშვნელოვნად შეამცირა მიკრობიომის მრავალფეროვნება და სიმდიდრე პრეპუპალურ ეტაპზე. მიკლობუტანილმა, კიდევ ერთმა სისტემურმა ფუნგიციდმა, მნიშვნელოვნად შეამცირა ლარვების სხეულის წონის მატება სამივე დოზის მიღებისას. ეს ეფექტი აშკარა იყო მეორე (მე-5 დღე) და მესამე (მე-8 დღე) დროს. ამის საპირისპიროდ, ციპროდინილმა და კაპტანმა მნიშვნელოვნად არ შეამცირეს წონის მატება ან გადარჩენადობა საკონტროლო ჯგუფთან შედარებით. ჩვენი ინფორმაციით, ეს ნაშრომი პირველია, რომელიც განსაზღვრავს სიმინდის კულტურების დასაცავად გამოყენებული სხვადასხვა ფუნგიციდების მინდვრის მაჩვენებლების გავლენას მტვრის პირდაპირი ზემოქმედებით.
ყველა ფუნგიციდური დამუშავება მნიშვნელოვნად ამცირებს სხეულის წონის მატებას საკონტროლო დამუშავებასთან შედარებით. მანკოზებს ყველაზე დიდი გავლენა ჰქონდათ ლარვის სხეულის წონის მატებაზე, საშუალოდ 51%-იანი შემცირებით, შემდეგ მოდიოდა პირითიოსტრობინი. თუმცა, სხვა კვლევებში არ არის აღწერილი ფუნგიციდების საველე დოზების უარყოფითი ეფექტები ლარვის სტადიებზე44. მიუხედავად იმისა, რომ დითიოკარბამატის ბიოციდებს დაბალი მწვავე ტოქსიკურობა აქვთ45, ეთილენბისდითიოკარბამატებს (EBDCS), როგორიცაა მანკოზები, შეუძლიათ შარდოვანას ეთილენსულფიდად დაშლა. სხვა ცხოველებზე მისი მუტაგენური ეფექტების გათვალისწინებით, ეს დაშლის პროდუქტი შეიძლება იყოს პასუხისმგებელი დაკვირვებულ ეფექტებზე46,47. წინა კვლევებმა აჩვენა, რომ ეთილენთიოშარდოვანას წარმოქმნაზე გავლენას ახდენს ისეთი ფაქტორები, როგორიცაა მომატებული ტემპერატურა48, ტენიანობის დონე49 და პროდუქტის შენახვის ხანგრძლივობა50. ბიოციდების სათანადო შენახვის პირობებს შეუძლია შეამსუბუქოს ეს გვერდითი მოვლენები. გარდა ამისა, ევროპის სურსათის უვნებლობის ორგანომ გამოთქვა შეშფოთება პირითიოპიდის ტოქსიკურობის შესახებ, რომელიც, როგორც აღმოჩნდა, კანცეროგენულია სხვა ცხოველების საჭმლის მომნელებელი სისტემებისთვის51.
მანკოზების, პირითიოსტრობინის და ტრიფლოქსისტრობინის პერორალური მიღება ზრდის სიმინდის ჭაღარას ლარვების სიკვდილიანობას. ამის საპირისპიროდ, მიკლობუტანილს, ციპროციკლინს და კაპტანს არანაირი გავლენა არ მოუხდენიათ სიკვდილიანობაზე. ეს შედეგები განსხვავდება ლადურნერის და სხვების შედეგებისგან52, რომლებმაც აჩვენეს, რომ კაპტანმა მნიშვნელოვნად შეამცირა ზრდასრული O. lignaria-ს და Apis mellifera L.-ს (Hymenoptera, Apisidae) გადარჩენა. გარდა ამისა, აღმოჩნდა, რომ ფუნგიციდები, როგორიცაა კაპტანი და ბოსკალიდი, იწვევენ ლარვების სიკვდილიანობას52,53,54 ან ცვლიან კვების ქცევას55. ამ ცვლილებებმა, თავის მხრივ, შეიძლება გავლენა მოახდინოს მტვრის კვებით ხარისხზე და საბოლოოდ ლარვის სტადიის ენერგიის მომატებაზე. საკონტროლო ჯგუფში დაფიქსირებული სიკვდილიანობა შეესაბამებოდა სხვა კვლევებს56,57.
ჩვენს კვლევაში დაფიქსირებული მამრების სქესთა კეთილგანწყობის თანაფარდობა შესაძლოა აიხსნას ისეთი ფაქტორებით, როგორიცაა არასაკმარისი შეჯვარება და ყვავილობის პერიოდში ცუდი ამინდის პირობები, როგორც ეს ადრე O. cornuta-სთვის ვიცენსმა და ბოშმა ივარაუდეს. მიუხედავად იმისა, რომ ჩვენს კვლევაში მონაწილე მდედრებსა და მამრებს შეჯვარებისთვის ოთხი დღე ჰქონდათ (პერიოდი, რომელიც ზოგადად საკმარისად ითვლება წარმატებული შეჯვარებისთვის), სტრესის მინიმიზაციის მიზნით, ჩვენ შეგნებულად შევამცირეთ სინათლის ინტენსივობა. თუმცა, ამ მოდიფიკაციამ შეიძლება უნებლიედ ხელი შეუშალოს შეჯვარების პროცესს61. გარდა ამისა, ფუტკრები რამდენიმე დღის განმავლობაში განიცდიან არახელსაყრელ ამინდს, მათ შორის წვიმას და დაბალ ტემპერატურას (<5°C), რამაც ასევე შეიძლება უარყოფითად იმოქმედოს შეჯვარების წარმატებაზე4,23.
მიუხედავად იმისა, რომ ჩვენი კვლევა მთლიანად ლარვის მიკრობიომაზე იყო ორიენტირებული, ჩვენი შედეგები ბაქტერიულ თემებს შორის პოტენციურ ურთიერთობებს გვაძლევს წარმოდგენას, რაც შეიძლება კრიტიკული იყოს ფუტკრის კვებისა და ფუნგიციდების ზემოქმედებისთვის. მაგალითად, მანკოზებით დამუშავებული მტვრის მქონე ლარვებს მნიშვნელოვნად შემცირებული ჰქონდათ მიკრობული საზოგადოების სტრუქტურა და სიმრავლე დაუმუშავებელ მტვერთან შედარებით. დაუმუშავებელ მტვერს რომ მოიხმარდნენ ლარვებს, ბაქტერიული ჯგუფები Proteobacteria და Actinobacteria დომინანტური იყო და უპირატესად აერობული ან ფაკულტატურად აერობული იყო. ცნობილია, რომ დელფტის ბაქტერიები, რომლებიც ჩვეულებრივ ასოცირდება მარტოხელა ფუტკრის სახეობებთან, ანტიბიოტიკურ აქტივობას ავლენენ, რაც პათოგენების წინააღმდეგ პოტენციურ დამცავ როლზე მიუთითებს. კიდევ ერთი ბაქტერიული სახეობა, Pseudomonas, უხვად იყო დაუმუშავებელი მტვრის მქონე ლარვებში, მაგრამ მნიშვნელოვნად შემცირებული იყო მანკოზებით დამუშავებულ ლარვებში. ჩვენი შედეგები ადასტურებს წინა კვლევებს, რომლებიც Pseudomonas-ს იდენტიფიცირებას უწევს, როგორც ერთ-ერთ ყველაზე გავრცელებულ გვარს O. bicornis35 და სხვა მარტოხელა კრაზანებში34. მიუხედავად იმისა, რომ Pseudomonas-ის როლის O. cornifrons-ის ჯანმრთელობაში ექსპერიმენტული მტკიცებულებები არ არის შესწავლილი, ნაჩვენებია, რომ ეს ბაქტერია ხელს უწყობს დამცავი ტოქსინების სინთეზს ხოჭო Paederus fuscipes-ში და ხელს უწყობს არგინინის მეტაბოლიზმს in vitro 35, 65. ეს დაკვირვებები მიუთითებს პოტენციურ როლზე ვირუსულ და ბაქტერიულ დაცვაში O. cornifrons-ის ლარვების განვითარების დროს. Microbacterium არის კიდევ ერთი გვარი, რომელიც, როგორც აღნიშნულია, დიდი რაოდენობითაა წარმოდგენილი შავი ჯარისკაცის ბუზის ლარვებში შიმშილის პირობებში66. O. cornifrons-ის ლარვებში მიკრობექტერიებმა შეიძლება წვლილი შეიტანონ ნაწლავის მიკრობიომის ბალანსსა და მდგრადობაში სტრესის პირობებში. გარდა ამისა, Rhodococcus გვხვდება O. cornifrons-ის ლარვებში და ცნობილია თავისი დეტოქსიკაციის უნარით67. ეს გვარი ასევე გვხვდება A. florea-ს ნაწლავებში, მაგრამ ძალიან დაბალი რაოდენობით68. ჩვენი შედეგები აჩვენებს მრავალი გენეტიკური ვარიაციის არსებობას მრავალ მიკრობულ ტაქსონში, რამაც შეიძლება შეცვალოს ლარვებში მეტაბოლური პროცესები. თუმცა, საჭიროა O. cornifrons-ის ფუნქციური მრავალფეროვნების უკეთ გაგება.
შეჯამებისთვის, შედეგები მიუთითებს, რომ მანკოზებმა, პირითიოსტრობინმა და ტრიფლოქსისტრობინმა შეამცირეს სხეულის წონის მატება და გაზარდეს სიმინდის ჭაობის ლარვების სიკვდილიანობა. მიუხედავად იმისა, რომ იზრდება შეშფოთება ფუნგიციდების დამამტვერიანებლებზე ზემოქმედების შესახებ, საჭიროა უკეთ გავიგოთ ამ ნაერთების ნარჩენი მეტაბოლიტების გავლენა. ეს შედეგები შეიძლება გათვალისწინებულ იქნას დამამტვერიანებლების ინტეგრირებული მართვის პროგრამების რეკომენდაციებში, რომლებიც ეხმარება ფერმერებს თავი აარიდონ გარკვეული ფუნგიციდების გამოყენებას ხეხილის ხეების ყვავილობამდე და მის დროს ფუნგიციდების შერჩევით და გამოყენების დროის ცვალებადობით, ან ნაკლებად მავნე ალტერნატივების გამოყენების წახალისებით. 36. ეს ინფორმაცია მნიშვნელოვანია პესტიციდების გამოყენებასთან დაკავშირებული რეკომენდაციების შესამუშავებლად, როგორიცაა არსებული შესხურების პროგრამების კორექტირება და შესხურების დროის შეცვლა ფუნგიციდების შერჩევისას ან ნაკლებად საშიში ალტერნატივების გამოყენების ხელშეწყობა. საჭიროა შემდგომი კვლევა ფუნგიციდების უარყოფითი ზემოქმედების შესახებ სქესთა თანაფარდობაზე, კვების ქცევაზე, ნაწლავის მიკრობიომაზე და სიმინდის ჭაობის წონის დაკლებისა და სიკვდილიანობის საფუძვლად მყოფ მოლეკულურ მექანიზმებზე.
ნახაზებზე 1 და 2 მოცემული წყაროს მონაცემები 1, 2 და 3 განთავსებულია figshare-ის მონაცემთა საცავში DOI: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 და https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996233. მიმდინარე კვლევაში გაანალიზებული თანმიმდევრობები (ნახ. 4, 5) ხელმისაწვდომია NCBI SRA საცავში PRJNA1023565 სარეგისტრაციო ნომრით.
ბოში, ჯ. და კემპი, ვ.პ. თაფლის ფუტკრის სახეობების, როგორც სასოფლო-სამეურნეო კულტურების დამამტვერიანებლების, განვითარება და დამკვიდრება: Osmia-ს გვარის (Hymenoptera: Megachilidae) და ხეხილის მაგალითი. ხარი. ნტომორი. რესურსი. 92, 3–16 (2002).
პარკერი, მ.გ. და სხვ. დამტვერვის პრაქტიკა და ალტერნატიული დამტვერავი საშუალებების აღქმა ნიუ-იორკსა და პენსილვანიაში ვაშლის მწარმოებლებს შორის. განახლება. სოფლის მეურნეობა. კვების სისტემები. 35, 1–14 (2020).
კოხი ი., ლონსდორფი ე.ვ., არცი დ.რ., პიტს-ზინგერი თ.ლ. და რიკეტსი თ.ჰ. ნუშის დამტვერვის ეკოლოგია და ეკონომიკა ადგილობრივი ფუტკრების გამოყენებით. ეკონომიკა. ნტომორი. 111, 16–25 (2018).
ლი, ე., ჰე, ი. და პარკი, ი.-ლ. კლიმატის ცვლილების გავლენა ტრაგოპანის ფენოლოგიაზე: შედეგები პოპულაციის მართვაზე. Climb. Change 150, 305–317 (2018).
არტცი, დ.რ. და პიტს-სინგერი, თ.ლ. ფუნგიციდისა და ადიუვანტური შესხურების გავლენა ორი მარტოხელა ფუტკრის (Osmia lignaria და Megachile rotundata) ბუდობის ქცევაზე. PloS One 10, e0135688 (2015).
ბოვე, ს. და სხვ. დაბალტოქსიკური კულტურული ფუნგიციდი (ფენბუკონაზოლი) ხელს უშლის მამრების რეპროდუქციული ხარისხის სიგნალებს, რაც იწვევს შეჯვარების წარმატების შემცირებას ველურ მარტოხელა ფუტკრებში. J. Apps. ecology. 59, 1596–1607 (2022).
სგოლასტრა ფ. და სხვ. ნეონიკოტინოიდური ინსექტიციდები და ერგოსტეროლის ბიოსინთეზი თრგუნავს სინერგიულ ფუნგიციდების სიკვდილიანობას ფუტკრის სამ სახეობაში. მავნებლების კონტროლი. მეცნიერება. 73, 1236–1243 (2017).
კუჰნემანი ჯ.გ., გილუნგი ჯ., ვან დაიკი მ.ტ., ფორდაისი რ.ფ. და დენფორტი ბ.ნ. მარტოხელა კრაზანას ლარვები ცვლიან ბაქტერიულ მრავალფეროვნებას, რომელსაც მტვერი აწვდის ღეროზე მცხოვრებ ფუტკრებს Osmia cornifrons (Megachilidae). front. მიკროორგანიზმი. 13, 1057626 (2023).
დჰარამპალი პ.ს., დენფორტი ბ.ნ. და სტეფანი ს.ა. ფერმენტირებულ მტვერში არსებული ექტოსიმბიოზური მიკროორგანიზმები ისეთივე მნიშვნელოვანია მარტოხელა ფუტკრების განვითარებისთვის, როგორც თავად მტვერი. ეკოლოგია. ევოლუცია. 12. e8788 (2022).
კელდერერი მ., მანიჩი ლ.მ., კაპუტო ფ. და ტალჰაიმერი მ. ვაშლის ბაღებში რიგთაშორისი დარგვა ხელახალი დათესვის დაავადებების კონტროლისთვის: პრაქტიკული ეფექტურობის კვლევა მიკრობულ ინდიკატორებზე დაყრდნობით. Plant Soil 357, 381–393 (2012).
მარტინ პ.ლ., კრავჩიკ თ., ხოდადადი ფ., აჩიმოვიჩ ს.გ. და პიტერ კ.ა. ვაშლის მწარე ლპობა შუა ატლანტიკურ შეერთებულ შტატებში: გამომწვევი სახეობების შეფასება და რეგიონული ამინდის პირობებისა და ჯიშის მგრძნობელობის გავლენა. ფიტოპათოლოგია 111, 966–981 (2021).
კალენი მ.გ., ტომპსონი ლ.ჯ., კაროლანი ჯ.კ., სტაუტი ჯ.კ. და სტენლი დ.ა. ფუნგიციდები, ჰერბიციდები და ფუტკრები: არსებული კვლევებისა და მეთოდების სისტემატური მიმოხილვა. PLoS One 14, e0225743 (2019).
პილინგი, ე.დ. და ჯეპსონი, პ.ს. EBI ფუნგიციდების და პირეტროიდული ინსექტიციდების სინერგიული ეფექტები თაფლის ფუტკრებზე (Apis mellifera). მავნებლების მეცნიერება. 39, 293–297 (1993).
მუსენი, EC, ლოპესი, JE და პენგი, CY შერჩეული ფუნგიციდების გავლენა თაფლის ფუტკრის ლარვების Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae) ზრდასა და განვითარებაზე. ოთხშაბათი. Ntomore. 33, 1151-1154 (2004).
ვან დაიკი, მ., მალენი, ე., ვიკსტედი, დ. და მაკარტი, ს. ხის ბაღებში დამამტვერიანებლების დასაცავად პესტიციდების გამოყენების შესახებ გადაწყვეტილების მიღების სახელმძღვანელო (კორნელის უნივერსიტეტი, 2018).
ივასაკი, ჯ.მ. და ჰოგენდორნი, კ. ფუტკრების არაპესტიციდების ზემოქმედება: მეთოდების მიმოხილვა და მოხსენებული შედეგები. სოფლის მეურნეობა. ეკოსისტემა. ოთხშაბათი. 314, 107423 (2021).
კოპიტი AM, კლინგერი E, კოქს-ფოსტერი DL, რამირესი RA. და პიტს-სინგერი TL. მიწოდების ტიპისა და პესტიციდების ზემოქმედების გავლენა Osmia lignaria-ს (Hymenoptera: Megachilidae) ლარვების განვითარებაზე. ოთხშაბათი. Ntomore. 51, 240–251 (2022).
კოპიტი AM და პიტს-სინგერი TL პესტიციდების ზემოქმედების გზები მარტოხელა ფუტკრებისთვის, რომლებიც ცარიელ ბუდეებში ცხოვრობენ. ოთხშაბათი. Ntomore. 47, 499–510 (2018).
პანი, ნ.ტ. და სხვ. ახალი შეწოვის ბიოანალიზის პროტოკოლი ზრდასრულ იაპონურ ბაღის ფუტკრებში (Osmia cornifrons) პესტიციდების ტოქსიკურობის შესაფასებლად. მეცნიერება. ანგარიშები 10, 9517 (2020).